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kw123

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR,求指教！

我以提取的总mRNA逆转录获得的cDNA为模板，以蛋白质氨基酸保守系列设计的兼并引物，我试过TR-PCR,Touchdown-PCR,梯度-PCR，p出来的都是引物二聚体（mRNA质量良好，用β-actin做内参能p出来），请高手指教！
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1楼 2012-09-20 19:40:32
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feiyur

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据你的描述，可能是引物设计的问题，重新设计一对引物试一试。
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2楼2012-09-21 01:04:14
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zq347597638

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是模板浓度高了   可以尝试减低模板量
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-21 15:50:42
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