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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达蛋白折叠不正确会有活性麽？
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dshlove

木虫 (正式写手)
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极解答问题 2012-09-20 15:37:07
引用回帖:
3楼: Originally posted by Marado at 2012-09-20 12:10:17
十分感谢，那如何能够减少标签的二聚体形成呢？
减少温度或者降低IPTG的浓度是否有用？
还有酶切的话，直接对蛋白进行酶切嘛？对蛋白酶切不太了解...

至于二聚体的形成，这好像和你用的质粒还有宿主有关系，涉及基因调控表达方面的了，怎么减少我没具体方案。不过，既然是表达过程形成的，我们可以降低宿主的表达速度，使蛋白有条不紊的折叠，我觉得就能降低二聚体的形成。
降低温度肯定是要的，IPTG浓度能用低的就不要高的。

酶切是看你在标签和蛋白之间有没有设计相应的酶切位点。比如说TEV，EK之类的特异性位点。
我之前说的酶切是让你检验一下你的标签有没有被包裹，酶切之后会不会影响活性。
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4楼2012-09-20 12:41:24
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