24小时热门版块排行榜    

查看: 2447  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yixuan1

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR空白跑出了与目的基因一样的一条浅带 已有4人参与

我最近PCR时,空白跑出了目的基因的条带,不过条带比较浅,阳性对照的比较亮,阴性对照没有。我把枪头,引物,配胶的溶剂以及电泳液都换成新的了,可是还是有条带,哪位好心的大侠指点下,这是哪里出了问题了呀?
PS:以前没有
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixuan1

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 无疆@行者 at 2012-09-18 18:30:54
你得说清楚阴性对照是什么,是无模板吗?如果是的话可能是引物或者水有问题

因为我的PCR是鉴定小鼠基因型的,所以阴性对照是WT,即B6小鼠的DNA;空白是水
7楼2012-09-19 17:33:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 鼓励发帖交流 2012-09-19 05:43:25
你得说清楚阴性对照是什么,是无模板吗?如果是的话可能是引物或者水有问题
2楼2012-09-18 18:30:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaorongbest

新虫 (小有名气)

★ ★
wizardfan: 金币+2, 很详细的经验分享,赞 2012-09-19 05:43:03
你做的是DNA的PCR还是RNA反转录呢?我排查了一下,PCR无非就那么几个关键的东西,一般最容易污染的是引物,但是引物已经换了;枪头一般都是一次性的影响不大,RNA的话对配胶容器要求严格;那最可能就是水污染了(还有:空白和模板是在一起的还是空白空中溢入模板DNA了?),你的水是高压后分装用吗?最好换一支水试试,其他的没了。
为客户提供更好的科研外包服务:如分子、免疫、病理、细胞培养、动物实验等
3楼2012-09-18 20:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hch123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以试试PCR时,先加混合液,再加空白,再加模版。实验室经验,但有时很有用。还是不行的话,建议你换下试剂,尤其是水。
脚踏实地:遇一个,学一个,会一个。。。
4楼2012-09-19 08:34:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-18 6/300 2026-03-18 22:15 by li123456789.
[考研] 321求调剂 +3 何润采123 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:27 by li123456789.
[考研] 0703化学 305求调剂 +3 FY_yy 2026-03-14 3/150 2026-03-18 19:40 by macy2011
[考研] 化工学硕306求调剂 +10 42838695 2026-03-12 10/500 2026-03-18 14:42 by haxia
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +4 材化逐梦人 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:22 by 007_lilei
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-13 6/300 2026-03-18 14:14 by 脱颖而出
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 296求调剂 +5 大口吃饭 身体健 2026-03-13 5/250 2026-03-17 21:05 by 不惑可乐
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 211本,11408一志愿中科院277分,曾在中科院自动化所实习 +6 Losir 2026-03-12 7/350 2026-03-17 12:09 by danranxie
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见