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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白浓度过低，无法做WB,如何进行蛋白浓缩？
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xylem

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白浓度过低，无法做WB,如何进行蛋白浓缩？

急着做完WB毕业,但提取蛋白的浓度太低，重新采样提蛋白已经不大可能，求高手指点蛋白经济，可靠的蛋白浓缩方法，最好附上具体的步骤。谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2012-09-12 23:06:00
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aixia5

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
xylem: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-15 00:40:08
引用回帖:
5楼: Originally posted by xylem at 2012-09-13 12:26:10
30kd.但这样会不会对蛋白损失过大啊，样品本来就不多。现在保存在裂解液中。
...

那你用3KD的或者10KD的，你的目标蛋白不损失就可以了。浓缩效果挺好的。一般用三种，一个是0.5ml浓缩到20ul，4ml浓缩到60ul，15ml浓缩到250ul.
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10楼2012-09-14 09:03:06
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
硫酸铵沉淀、冻干或者是密理博的超滤管浓缩
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2楼2012-09-13 09:36:35
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aixia5

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
买一个millipore的超滤管就可以了，一个100左右，离心就可以了。你要的蛋白是多少KD的？
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-13 10:20:43
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_然然

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
放在透析袋里 peg6000透析
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-13 10:27:56
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