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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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M110899

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] PCR问题求助

最近用空载体和水分别作模板,结果PCR还是能够扩出目的条带,请问这是为什么呢?我的引物以前用过,证明是没有问题的,Taq酶什么的都是刚订的,为什么这样还能扩增出目的条带?谢谢各位
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dshlove

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的引物是不是污染了。
2楼2012-09-04 15:52:10
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世外清风

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
M110899: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-05 10:42:03
肯定有一个东西污染了,毫无疑问,全换新的试试吧
3楼2012-09-04 16:59:20
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gwd0312

版主

“无冕之王”

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
肯定是污染了,PCR最怕遇见这样的事情,你还是都换了吧,不要舍不得!
持之以恒、永不放弃!
4楼2012-09-04 19:04:57
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M110899

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-04 15:52:10
你的引物是不是污染了。

引物最后一次用,都还是好好的,后来一直放-20,应该没有问题,体系里面除了引物之外,其他都是新的,而且PET-32a是前期提取了跟目的片段连接的,应该也没有问题。
5楼2012-09-04 19:09:14
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M110899

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
3楼: Originally posted by 世外清风 at 2012-09-04 16:59:20
肯定有一个东西污染了,毫无疑问,全换新的试试吧

觉得有可能是实验室配的双蒸水有问题
6楼2012-09-04 19:09:53
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M110899

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
4楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-04 19:04:57
肯定是污染了,PCR最怕遇见这样的事情,你还是都换了吧,不要舍不得!

谢谢,我再排除吧
7楼2012-09-04 19:10:19
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xiongyaoling

主管区长

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【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
M110899: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-05 10:40:39
我觉得还是污染了,可能受到气溶胶的污染,PCR的时候超净工作台最好不要开风!
8楼2012-09-05 10:09:47
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M110899

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
8楼: Originally posted by xiongyaoling at 2012-09-05 10:09:47
我觉得还是污染了,可能受到气溶胶的污染,PCR的时候超净工作台最好不要开风!

以前PCR都是在外面做,现在拿到超净台做,但每次都会通风。谢谢你的建议,我会试试
9楼2012-09-05 10:41:20
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M110899

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
3楼: Originally posted by 世外清风 at 2012-09-04 16:59:20
肯定有一个东西污染了,毫无疑问,全换新的试试吧

我也知道是有污染了,一直在排除,一直没找出污染源
10楼2012-09-05 10:41:56
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