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M110899

金虫 (正式写手)

[求助] PCR问题求助

最近用空载体和水分别作模板，结果PCR还是能够扩出目的条带，请问这是为什么呢？我的引物以前用过，证明是没有问题的，Taq酶什么的都是刚订的，为什么这样还能扩增出目的条带？谢谢各位
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1楼 2012-09-04 14:15:26
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的引物是不是污染了。
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2楼2012-09-04 15:52:10
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
M110899: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-05 10:42:03
肯定有一个东西污染了，毫无疑问，全换新的试试吧
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3楼2012-09-04 16:59:20
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
肯定是污染了，PCR最怕遇见这样的事情，你还是都换了吧，不要舍不得！
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持之以恒、永不放弃！
4楼2012-09-04 19:04:57
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-09-04 15:52:10
你的引物是不是污染了。

引物最后一次用，都还是好好的，后来一直放-20，应该没有问题，体系里面除了引物之外，其他都是新的，而且PET-32a是前期提取了跟目的片段连接的，应该也没有问题。
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5楼2012-09-04 19:09:14
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 世外清风 at 2012-09-04 16:59:20
肯定有一个东西污染了，毫无疑问，全换新的试试吧

觉得有可能是实验室配的双蒸水有问题
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6楼2012-09-04 19:09:53
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-04 19:04:57
肯定是污染了，PCR最怕遇见这样的事情，你还是都换了吧，不要舍不得！

谢谢，我再排除吧
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7楼2012-09-04 19:10:19
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xiongyaoling

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
M110899: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-05 10:40:39
我觉得还是污染了，可能受到气溶胶的污染，PCR的时候超净工作台最好不要开风！
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8楼2012-09-05 10:09:47
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiongyaoling at 2012-09-05 10:09:47
我觉得还是污染了，可能受到气溶胶的污染，PCR的时候超净工作台最好不要开风！

以前PCR都是在外面做，现在拿到超净台做，但每次都会通风。谢谢你的建议，我会试试
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9楼2012-09-05 10:41:20
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M110899

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 世外清风 at 2012-09-04 16:59:20
肯定有一个东西污染了，毫无疑问，全换新的试试吧

我也知道是有污染了，一直在排除，一直没找出污染源
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10楼2012-09-05 10:41:56
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