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chen-xf

铜虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量pcr标准曲线

请问各位高手,在做荧光定量PCR标准曲线的预实验,模板共稀释了9个浓度,从10-4到10-13,发现稀释倍数最高的几个模板,Ct值几乎一样,是什么原因?
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huihui1qq

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助, 感谢啊! 2012-08-29 11:59:11
模板浓度太低,加一个NTC你就明白了
海南暖和
2楼2012-08-28 16:36:16
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chen-xf

铜虫 (初入文坛)

非常感谢!我再试试
3楼2012-08-28 17:12:25
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助 2012-08-29 11:58:12
去掉最后几个点就可以了,一般最少5点多则更好。
4楼2012-08-28 19:41:04
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助, 感谢! 2012-08-29 11:59:40
第一、从10-4到10-13,一共是10个浓度
第二、浓度太低了。
总有一天我要修改用户名。
5楼2012-08-28 20:56:50
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linxi185856

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般不用稀释那么多倍数的,四到七个浓度梯度是最好
6楼2012-08-29 18:29:54
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chen-xf

铜虫 (初入文坛)

现在标线和处理样本跑出来都没问题,可是NTC有单峰出现,是污染了吗?
7楼2012-08-30 16:36:25
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dandania

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助 2012-09-03 17:01:13
恩恩,话说,之前应该是模板降解的问题,NTC的问题有点纠结了额
8楼2012-08-30 22:41:54
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