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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量pcr标准曲线
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chen-xf

铜虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量pcr标准曲线

请问各位高手，在做荧光定量PCR标准曲线的预实验，模板共稀释了9个浓度，从10-4到10-13，发现稀释倍数最高的几个模板，Ct值几乎一样，是什么原因？
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1楼 2012-08-28 15:21:09
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huihui1qq

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助, 感谢啊！ 2012-08-29 11:59:11
模板浓度太低，加一个NTC你就明白了
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海南暖和
2楼2012-08-28 16:36:16
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chen-xf

铜虫 (初入文坛)
非常感谢！我再试试
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3楼2012-08-28 17:12:25
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助 2012-08-29 11:58:12
去掉最后几个点就可以了，一般最少5点多则更好。
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4楼2012-08-28 19:41:04
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助, 感谢！ 2012-08-29 11:59:40
第一、从10-4到10-13，一共是10个浓度
第二、浓度太低了。
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总有一天我要修改用户名。
5楼2012-08-28 20:56:50
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linxi185856

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般不用稀释那么多倍数的，四到七个浓度梯度是最好
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6楼2012-08-29 18:29:54
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chen-xf

铜虫 (初入文坛)
现在标线和处理样本跑出来都没问题，可是NTC有单峰出现，是污染了吗？
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7楼2012-08-30 16:36:25
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dandania

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chen-xf: 金币+5, ★有帮助 2012-09-03 17:01:13
恩恩，话说，之前应该是模板降解的问题，NTC的问题有点纠结了额
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8楼2012-08-30 22:41:54
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