24小时热门版块排行榜    

查看: 3340  |  回复: 7
【悬赏金币】回答本帖问题,作者lilirong2009将赠送您 8 个金币
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极解答问题 2012-08-27 13:33:10
对于特异性,你的pcr结果已经不错了,个人不建议你为了增加特异性而再增加退火温度;pcr的循环数一般20--35个循环足矣,到后期你里面的dNTP也都没有了,都是无效循环。所以建议你减少循环数;同时也建议你减少退火时间到25s或30s。
对于产量,有几个建议:
增加PCR平行数,以量增加最后产量;  将你的pcr产物稀释100--200倍后作为模板再进行pcr;   利用touch down PCR,一定程度可以增加。
对于pcr,建议不要加太多酶,不出条带应该继续降低退火温度。一般pcr的退火温度比算出来的Tm值少5--10度。
以上仅为个人建议。
5楼2012-08-27 12:23:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

相关版块跳转 我要订阅楼主 lilirong2009 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 高校辞职,要求赔偿,这到底合不合理 +20 传动_海神 2024-06-23 28/1400 2024-06-24 19:49 by 传动_海神
[基金申请] 自然基金变化?? +13 今晚推荐22 2024-06-21 23/1150 2024-06-24 17:20 by 舟言川
[基金申请] 这样的说辞是上会了吗 +9 学员d3zYCz 2024-06-24 12/600 2024-06-24 16:46 by yingxz
[基金申请] 厅级项目出校却没中 +10 Iwould 2024-06-23 17/850 2024-06-24 12:11 by 进击的荣耀
[基金申请] 能看出是否上会了吗 +9 articlefan 2024-06-23 11/550 2024-06-24 11:20 by articlefan
[基金申请] 国自然资助比率是不是要下降了?? +8 今晚推荐22 2024-06-21 12/600 2024-06-24 11:15 by Pickfoot
[考研] 刚当完兵回来想考研 +3 五官在线 2024-06-23 13/650 2024-06-24 11:04 by 五官在线
[催化] 求助原位红外 +3 jfdhj 2024-06-21 7/350 2024-06-24 10:52 by qvhm2609
[有机交流] 三颈瓶加热 5+4 wzjwx888 2024-06-20 4/200 2024-06-24 10:11 by w87437985
[考博] 一名额难求啊 +12 pinbo拼搏 2024-06-19 12/600 2024-06-24 10:06 by 6784
[公派出国] 博士csc联培会看重第一学历学校层次吗 +4 也就这样 2024-06-23 4/200 2024-06-24 08:18 by 晓目崇
[教师之家] 有没有今年的影响因子? +6 jurkat.1640 2024-06-22 8/400 2024-06-24 07:25 by HiRocLiN丶
[基金申请] b口yq上会情况 +5 XUAAAAA 2024-06-19 6/300 2024-06-24 01:13 by sunrise3148
[论文投稿] Pattern Recognition期刊,二审审稿邀请发出一个月了,但有一个审稿人一直未接受审稿 5+4 PLVS_VLTRA 2024-06-19 9/450 2024-06-24 00:16 by holypower
[论文投稿] OSA期刊审稿逾期 +3 Thomas_Squid 2024-06-22 3/150 2024-06-23 15:20 by wspglt
[基金申请] 国产期刊影响因子大于12的有20多个个了 +17 babu2015 2024-06-20 22/1100 2024-06-23 13:12 by 德尚中行
[硕博家园] 夏至,要不要硕博联谊 +3 我是王小帅 2024-06-21 5/250 2024-06-22 22:51 by 我是王小帅
[硕博家园] 豫北虫友互识 +13 xuhongli903 2024-06-18 14/700 2024-06-21 18:24 by 雨后春笋!
[论文投稿] 投稿求助 6+3 小短腿安琪拉 2024-06-19 4/200 2024-06-20 17:40 by 不一样烟火12345
[基金申请] 青年基金会评专家到底是怎么会评的呀?主审专家是不是一般不会改动系统按函评给的顺序 5+4 他山攻玉之石 2024-06-18 18/900 2024-06-20 16:33 by 他山攻玉之石
信息提示
请填处理意见