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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌接种、扩培摇不活怎么解决
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简单HE认真

木虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌接种、扩培摇不活怎么解决

含有目的基因的PGEX-4T重组质粒宿主BL21或Rosstta，在氨苄抗性试管中过夜培养摇浓，扩培时常出现死菌情况。 求原因及解决方法！
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简单做人，认真做事。
1楼 2012-08-25 15:55:54
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lly198784

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的扩培出现死菌，说明它之前肯定长起来的，一方面可能是菌体保存时间太长没有经过划线单菌落复苏，还有一方面你有没有加诱导剂,诱导剂是不是加的早了。
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6楼2012-08-29 09:56:14
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生物-TJAB

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能表达的蛋白对宿主有毒害作用！就会出现要不起来的可能啊！你可以换宿主比如抗毒害的BL(DE3)PLSS！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2012-08-26 00:07:17
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以尝试一下，不加氨苄试一下
赞一下 回复此楼
总有一天我要修改用户名。
3楼2012-08-26 08:47:49
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dongniaoxin

铁杆木虫 (正式写手)

响当当的木头

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在加氨苄的培养基中过夜培养时，次日浓度是多少，是不是此时就已经死菌了呢？
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没有梦就走，没有错就不向谁低头
4楼2012-08-26 21:23:23
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