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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答中转子版 » 大肠杆菌一般传多少代就不能用来做实验了
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huikityy

禁虫 (小有名气)
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1楼 2010-11-18 22:16:52
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lilyxu2010

木虫 (小有名气)
路过看看  也不太清楚 希望早日找到答案
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2楼2010-11-19 08:04:54
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rhy1027

金虫 (正式写手)
huikityy(金币+9, 博学EPI+1):谢谢 今天又看了一下我的大肠菌好像是不长了死了？ 若是甘油保存的话用百分之多少的甘油，斜面上的菌用什么冲下来 2010-11-20 09:02:59
大肠杆菌要是保藏方法得当的话，用3-5年是不成问题的！你的菌要是活力不够，就用加糖的平板活化，然后再用液态培养的方法传两代，对数期的时候加甘油-80保藏！必要的时候，可用液氮速冻后，再放-80。需要注意的是保甘油菌的时候一定要把菌和甘油充分混合，保证密度均一！
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3楼2010-11-19 14:42:08
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zzhongji1

铜虫 (初入文坛)
楼上正解~~~
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4楼2010-11-19 21:24:44
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rhy1027

金虫 (正式写手)
我经常用的甘油浓度为25%，正常范围是在20%-30%！如果上次冻得已经彻底不长的话，我也没有回天之术了！但如果你还抱有一线希望的话，可以试试下面的办法：

将你的菌种接一环在含0.2%的Glucose的平板上（须有相应的抗生素）30度过夜，一定要按照4部划线法，保证你能拿到单菌落，然后第二天再选大小适中的单菌落接种到液体培养基中(别忘记加相应的抗生素)，然后37度，280rpm长到OD0.6-0.8 ，之后再按照之前说的方法去保甘油菌！

你提到的斜面上的菌怎么融下来，直接用你的空白培养基就可以！
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5楼2010-11-23 17:52:55
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chuanqizhou

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by huikityy at 2010-11-18 22:16:52:
实验室的大肠杆菌养了一年半了，传了十五代了，最近传代老是长不好，还能用吗。那位高手知道或是有这方面的资料，谢谢啦～～～～

重新划平板。

根据你的情况，也可能是染其他菌了
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6楼2010-11-24 09:42:32
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