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huikityy

禁虫 (小有名气)

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lilyxu2010

木虫 (小有名气)


路过看看  也不太清楚 希望早日找到答案
2楼2010-11-19 08:04:54
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rhy1027

金虫 (正式写手)


huikityy(金币+9, 博学EPI+1):谢谢 今天又看了一下我的大肠菌好像是不长了死了? 若是甘油保存的话用百分之多少的甘油,斜面上的菌用什么冲下来 2010-11-20 09:02:59
大肠杆菌要是保藏方法得当的话,用3-5年是不成问题的!你的菌要是活力不够,就用加糖的平板活化,然后再用液态培养的方法传两代,对数期的时候加甘油-80保藏!必要的时候,可用液氮速冻后,再放-80。需要注意的是保甘油菌的时候一定要把菌和甘油充分混合,保证密度均一!
3楼2010-11-19 14:42:08
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zzhongji1

铜虫 (初入文坛)


楼上正解~~~
4楼2010-11-19 21:24:44
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rhy1027

金虫 (正式写手)


我经常用的甘油浓度为25%,正常范围是在20%-30%!如果上次冻得已经彻底不长的话,我也没有回天之术了!但如果你还抱有一线希望的话,可以试试下面的办法:

将你的菌种接一环在含0.2%的Glucose的平板上(须有相应的抗生素)30度过夜,一定要按照4部划线法,保证你能拿到单菌落,然后第二天再选大小适中的单菌落接种到液体培养基中(别忘记加相应的抗生素),然后37度,280rpm长到OD0.6-0.8 ,之后再按照之前说的方法去保甘油菌!

你提到的斜面上的菌怎么融下来,直接用你的空白培养基就可以!
5楼2010-11-23 17:52:55
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chuanqizhou

新虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by huikityy at 2010-11-18 22:16:52:
实验室的大肠杆菌养了一年半了,传了十五代了,最近传代老是长不好,还能用吗。那位高手知道或是有这方面的资料,谢谢啦~~~~

重新划平板。

根据你的情况,也可能是染其他菌了
6楼2010-11-24 09:42:32
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