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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 手工提取DNA浓度
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)

[求助] 手工提取DNA浓度

我手工提取的DNA浓度是0.038μg/μl，是不是太低了？想知道这个浓度能做PCR吗？
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1楼 2012-08-24 17:11:23
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lillian菲

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
萌主李萌萌: 金币+1, ★有帮助 2012-09-27 11:07:34
我们做pcr具体没算过浓度，直接做，不知道您后续是做什么用呢？还有您做PCR做的体系是多少的？一般10ul模版1ul就很多了。根据实际情况吧，如果浓度低，你就多放点模版吧
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2楼2012-08-24 17:52:34
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-08-24 17:52:34
我们做pcr具体没算过浓度，直接做，不知道您后续是做什么用呢？还有您做PCR做的体系是多少的？一般10ul模版1ul就很多了。根据实际情况吧，如果浓度低，你就多放点模版吧

我就是因为P不出来怀疑是DNA没提出来，所以测DNA浓度，提前测得0.015μg/μl，做过梯度，也都不行
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3楼2012-08-24 18:58:46
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wittyjc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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萌主李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助, 虽然单位错了，但还是很不错哦 2012-08-25 09:25:01
0.038相当于提取失败，我们一般提的差的都得有200μg/μl左右，提的好的得有2000μg/μl，然后稀释成30-40μg/μl左右进行PCR实验。
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4楼2012-08-24 19:49:08
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wittyjc

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wittyjc at 2012-08-24 19:49:08
0.038相当于提取失败，我们一般提的差的都得有200μg/μl左右，提的好的得有2000μg/μl，然后稀释成30-40μg/μl左右进行PCR实验。

不好意思看错单位了。我们的单位是ng/μl。
这样子说的话你提的溶度还是稍低，但做普通PCR应该没问题。
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5楼2012-08-24 19:52:05
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生物-TJAB

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
萌主李萌萌: 金币+1, ★有帮助, 增加了我的信心！ 2012-08-25 09:25:25
这个浓度可以做PCR啊！我们经常用这样的浓度做的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2012-08-25 09:01:10
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wittyjc at 2012-08-24 19:49:08
0.038相当于提取失败，我们一般提的差的都得有200μg/μl左右，提的好的得有2000μg/μl，然后稀释成30-40μg/μl左右进行PCR实验。

你是从哪里提取的？我是从虫卵中，不好裂解，这点不知道能不能用啊？
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7楼2012-08-25 09:18:45
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wittyjc at 2012-08-24 19:52:05
不好意思看错单位了。我们的单位是ng/μl。
这样子说的话你提的溶度还是稍低，但做普通PCR应该没问题。...

额，我还没看到这条，吓死我了，差一个数量级，我加大了模板的量，不知道能不能成功。
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8楼2012-08-25 09:20:31
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 生物-TJAB at 2012-08-25 09:01:10
这个浓度可以做PCR啊！我们经常用这样的浓度做的

谢谢了，我今天做了一个试试
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9楼2012-08-25 09:21:34
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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萌主李萌萌: 金币+1, ★有帮助 2012-09-27 11:07:21
这个浓度肯定是可以做PCR的。但是对于提质粒，这个浓度就算很低了。应该改进一下。
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10楼2012-08-25 11:05:35
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