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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 手工提取DNA浓度
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)

[求助] 手工提取DNA浓度

我手工提取的DNA浓度是0.038μg/μl，是不是太低了？想知道这个浓度能做PCR吗？
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1楼 2012-08-24 17:11:23
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-08-24 17:52:34
我们做pcr具体没算过浓度，直接做，不知道您后续是做什么用呢？还有您做PCR做的体系是多少的？一般10ul模版1ul就很多了。根据实际情况吧，如果浓度低，你就多放点模版吧

我就是因为P不出来怀疑是DNA没提出来，所以测DNA浓度，提前测得0.015μg/μl，做过梯度，也都不行
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3楼2012-08-24 18:58:46
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by wittyjc at 2012-08-24 19:49:08
0.038相当于提取失败，我们一般提的差的都得有200μg/μl左右，提的好的得有2000μg/μl，然后稀释成30-40μg/μl左右进行PCR实验。

你是从哪里提取的？我是从虫卵中，不好裂解，这点不知道能不能用啊？
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7楼2012-08-25 09:18:45
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
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5楼: Originally posted by wittyjc at 2012-08-24 19:52:05
不好意思看错单位了。我们的单位是ng/μl。
这样子说的话你提的溶度还是稍低，但做普通PCR应该没问题。...

额，我还没看到这条，吓死我了，差一个数量级，我加大了模板的量，不知道能不能成功。
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8楼2012-08-25 09:20:31
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铜虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by 生物-TJAB at 2012-08-25 09:01:10
这个浓度可以做PCR啊！我们经常用这样的浓度做的

谢谢了，我今天做了一个试试
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9楼2012-08-25 09:21:34
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铜虫 (初入文坛)
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10楼: Originally posted by reallpf at 2012-08-25 11:05:35
这个浓度肯定是可以做PCR的。但是对于提质粒，这个浓度就算很低了。应该改进一下。

我昨天又没做出来啊，做了梯度也不可以，如果这个浓度真行，那岂不是我的引物出问题了？好难过。。。
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12楼2012-08-26 09:11:22
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萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
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11楼: Originally posted by wittyjc at 2012-08-25 13:07:52
你这DNA是全基因组？你的引物设计对象是核基因还是线粒体。
你确定一下你的引物是不是一定能跑出条带~...

是全基因组，针对的是核基因，引物跑胶？那个怎么跑啊？多谢指教了
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13楼2012-08-26 09:14:22
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