应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆的高手请指点一二
51/1返回列表
查看: 832  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

梦之奋斗

新虫 (初入文坛)

[求助] 克隆的高手请指点一二

请问各位做克隆的大侠：克隆基因的过程中拿3'端片段的时候用race还是反向PCR技术会好做一点啊，成功的几率要大点呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-24 15:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦之奋斗

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mgangle at 2012-08-24 20:49:14
原理都一样！我们也经常用M4T做植物基因的3 RACE！M4T是通过对各个mRNA的polyA尾部碱基序列统计得来的！所以基本适用植物基因。...

哦，那是的吧，那先是哈race来做！
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-24 23:01:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-24 21:34:44
3·端的话用RACE做好些，也挺方便！cDNA合成时不要用OligdT，用M4T反转录，这样你只要设计3条不同位置的上游引物（分别命名为P1，P2，P3），以M4T为下游引物，第一次用P1和M4T cDNA为模板，第二次用P2和M4T 第一次PCR产物为模板，第三次用P3和M4T 第二次PCR产物为模板，OK，搞定！（M4T序列百度就能百出来，做病毒常用的引物）
赞一下 回复此楼
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起，么有鱼丸粗面。。那，我要鱼丸么有鱼丸那，我要粗面…………么有粗面那，我要鱼丸粗面……………………
2楼2012-08-24 15:26:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦之奋斗

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mgangle at 2012-08-24 15:26:22
3·端的话用RACE做好些，也挺方便！cDNA合成时不要用OligdT，用M4T反转录，这样你只要设计3条不同位置的上游引物（分别命名为P1，P2，P3），以M4T为下游引物，第一次用P1和M4T cDNA为模板，第二次用P2和M4T 第一次P ...

做的不是病毒呢，植物类！
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-24 20:45:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mgangle

铁杆木虫 (著名写手)

乐乐家族-----乐颠颠

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦之奋斗 at 2012-08-24 20:45:22
做的不是病毒呢，植物类！...

原理都一样！我们也经常用M4T做植物基因的3 RACE！M4T是通过对各个mRNA的polyA尾部碱基序列统计得来的！所以基本适用植物基因。
赞一下 回复此楼
麦兜麦兜~~~我要一碗鱼丸粗面。。对不起，么有鱼丸粗面。。那，我要鱼丸么有鱼丸那，我要粗面…………么有粗面那，我要鱼丸粗面……………………
4楼2012-08-24 20:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭