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[求助]
求助啊，有DNA浓度，没有目的条带
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P了好几天没有结果。。。 阳性对照检验PCR体系没有问题，觉得DNA没提出来，今天换方法提了一次测浓度是74.57微克每毫升，P完之后又测浓度是10000多，可是电泳还是没有条带啊！PS：阳性对照和我的目的片段差不多大，它却出来了，请各位大神分析一下问题在哪里啊？多谢了。。。  |
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【答案】应助回帖
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amisking: 回帖置顶 2012-08-21 20:02:01
萌主李萌萌: 金币+1, ★★★很有帮助, 多谢高手指教~ 2012-08-22 18:18:04
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1、PCR后测DNA溶度是不太靠谱的，因为体系中有引物，dNTPs，还有模板，这都会导致你所测得溶度偏高。 2、可能的原因引物有问题，或试着去设置一个退火温度；Mg离子溶度过低，使聚合酶的活性下降，产物减少。当然，如果你的上样量是是根据你测得DNA溶度而推出的话，建议你上样时多上点。。。。。。 |
3楼2012-08-21 16:01:28
gungunak47 
铁虫 (初入文坛)
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