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暗夜懒猫

银虫 (小有名气)

[求助] 酶切验证结果分析

最近做原核载体构建,将目的基因与载体pet-28a相连,转化大肠杆菌DH5a,通过蓝白斑筛选挑取白斑做菌落PCR检测,电泳结果显示有我目的片段大小的条带,然后从菌液中提取质粒做酶切验证,可是酶切后却没有目的条带大小,但反而出现两条分子量较大的条带,哪位高手帮我解释一下原因呢,不甘心转化就这么失败了啊,是不是质粒没切开?还是真的转化失败了啊?          图中的Maker是5K的,我的目的基因大小为1.0K和1.5K。
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xingxingsf

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

看样子像是质粒没被切开,检查下酶的种类、酶切条件是不是有问题,是否加BSA之类的。如果还切不开的话只能说明你的质粒有问题啦。
2楼2012-12-02 12:12:48
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