| 查看: 2588 | 回复: 11 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
sherrysure银虫 (小有名气)
|
[求助]
对于一个没有内含子的基因，请问用基因组或cDNA作为模板跑PCR对于结果有什么影响吗？
|
|
|
请问大家， 对于一个没有内含子的基因，用基因组或cDNA作为模板跑PCR对于结果有什么影响吗？ 我在扩一个基因，用公布的mRNA序列设计的引物，文献上都是用反转录后的cDNA跑的PCR，但是我将这一序列到我所做的生物基因组中比对后发现其没有内含子，所以我就用它的基因组试着跑PCR，可是没有条带，不知道是什么原因。 还希望高手不吝赐教。 另外还想请问一下： 跑PCR的时候，什么时候用rTaq酶，什么时候用LA Taq酶？ 两者PCR对后续实验又影响吗？ 万分感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有186人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因组PCR的问题
已经有3人回复
- 提基因组的时候做第一次PCR效果很好，但是直接以PCR产物做第二次PCR的模版后...
已经有14人回复
- 【求助】用cDNA的ORF序列以基因组DNA为模板 做PCR 为何P不出其对应的基因组序列?
已经有8人回复
- 小白请问，cDNA第一条链合成后如何做PCR了？
已经有5人回复
- real time PCR能测定基因组内某一基因的拷贝数吗？
已经有4人回复
- 想问下在以cDNA为模板时，PCR的结果却是徒步 什么原因
已经有5人回复
- 【求助/交流】基因没有内含子序列说明什么问题啊
已经有5人回复
- 如何确定cDNA中是否还含有基因组DNA？
已经有7人回复
- 【求助/交流】是否所有的基因都有内含子？
已经有11人回复
- 【求助/交流】从RNA中扩出含内含子的全基因片段
已经有12人回复
- 【求助/交流】跨越内含子序列的基因组序列的翻译如何进行
已经有3人回复
- 【求助/交流】在真菌基因组中PCR基因，难吗？
已经有18人回复
- 【求助/交流】细菌基因组为模板做pcr的问题
已经有5人回复
sherrysure
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1117.5
- 散金: 8
- 红花: 2
- 帖子: 121
- 在线: 82.4小时
- 虫号: 1285648
- 注册: 2011-05-04
- 专业: 兽医寄生虫学
5楼2012-08-21 13:10:04
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+5, 鼓励新虫发帖交流，欢迎常来生物医药区发帖贡献。 2012-08-16 20:16:56
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+5, 鼓励新虫发帖交流，欢迎常来生物医药区发帖贡献。 2012-08-16 20:16:56
| 基因与mRNA反转录到的DNA是不一样的，基因即使没有内含子，也会有基因转录的调控序列等，要比mRNA反转录得到的序列长，此外，初级转录产物还可能会被间接修饰等。所以不能用基因序列代替cDNA。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
sherrysure
2楼2012-08-16 17:45:56
sherrysure
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1117.5
- 散金: 8
- 红花: 2
- 帖子: 121
- 在线: 82.4小时
- 虫号: 1285648
- 注册: 2011-05-04
- 专业: 兽医寄生虫学
3楼2012-08-21 09:01:12
4楼2012-08-21 09:32:58
10