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lillian菲

银虫 (小有名气)

[求助] 请问哪个质粒上既有KpnI酶切位点又有NotI酶切位点?

现在试验中遇到问题,想找个质粒,其上的酶切位点既有KpnI酶切位点又有NotI酶切位点的,除了pPICZA质粒外,最好是能原核表达的。谢谢!
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


lillian菲: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-08-16 17:02:37
引用回帖:
3楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-08-16 16:52:04
你好,先谢谢您的帮助。我有一段基因,两端是这两个酶切位点,想通过酶切再酶连插入这段目的基因的。常用的是您说的这几个是吧?...

是的,其中比较常用的PET32a,你构建完成了是想用于大肠杆菌表达么?你可以去下一个PET32a的图谱看看~
4楼2012-08-16 16:55:04
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是问载体吧?载体有很多都有这两种酶切位点的,不过你要具体看实际情况选择合适的载体。
我就不一一列举了,列几个比较常用的吧。pCDFDuet-1 ,pET30a,pET32a,pET47b。
2楼2012-08-16 16:43:22
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lillian菲

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gelois at 2012-08-16 16:43:22
你是问载体吧?载体有很多都有这两种酶切位点的,不过你要具体看实际情况选择合适的载体。
我就不一一列举了,列几个比较常用的吧。pCDFDuet-1 ,pET30a,pET32a,pET47b。

你好,先谢谢您的帮助。我有一段基因,两端是这两个酶切位点,想通过酶切再酶连插入这段目的基因的。常用的是您说的这几个是吧?
3楼2012-08-16 16:52:04
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lillian菲

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by gelois at 2012-08-16 16:55:04
是的,其中比较常用的PET32a,你构建完成了是想用于大肠杆菌表达么?你可以去下一个PET32a的图谱看看~...

恩恩,是滴。因为我这段目的片段是通过酶连得到的,想先放在质粒上,先做原核表达,后面如果做原核表达也可以。如果做真核,直接酶切下来再连入真核载体就可以了。比较方便使用的。谢谢啦!
5楼2012-08-16 16:58:39
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