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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问哪个质粒上既有KpnI酶切位点又有NotI酶切位点？
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lillian菲

银虫 (小有名气)

[求助] 请问哪个质粒上既有KpnI酶切位点又有NotI酶切位点？

现在试验中遇到问题，想找个质粒，其上的酶切位点既有KpnI酶切位点又有NotI酶切位点的，除了pPICZA质粒外，最好是能原核表达的。谢谢！
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1楼 2012-08-16 15:42:37
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gelois at 2012-08-16 16:43:22
你是问载体吧？载体有很多都有这两种酶切位点的，不过你要具体看实际情况选择合适的载体。
我就不一一列举了，列几个比较常用的吧。pCDFDuet-1 ，pET30a，pET32a，pET47b。

你好，先谢谢您的帮助。我有一段基因，两端是这两个酶切位点，想通过酶切再酶连插入这段目的基因的。常用的是您说的这几个是吧？
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3楼2012-08-16 16:52:04
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是问载体吧？载体有很多都有这两种酶切位点的，不过你要具体看实际情况选择合适的载体。
我就不一一列举了，列几个比较常用的吧。pCDFDuet-1 ，pET30a，pET32a，pET47b。
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2楼2012-08-16 16:43:22
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
lillian菲: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-08-16 17:02:37
引用回帖:
3楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-08-16 16:52:04
你好，先谢谢您的帮助。我有一段基因，两端是这两个酶切位点，想通过酶切再酶连插入这段目的基因的。常用的是您说的这几个是吧？...

是的，其中比较常用的PET32a，你构建完成了是想用于大肠杆菌表达么?你可以去下一个PET32a的图谱看看~
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4楼2012-08-16 16:55:04
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lillian菲

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gelois at 2012-08-16 16:55:04
是的，其中比较常用的PET32a，你构建完成了是想用于大肠杆菌表达么?你可以去下一个PET32a的图谱看看~...

恩恩，是滴。因为我这段目的片段是通过酶连得到的，想先放在质粒上，先做原核表达，后面如果做原核表达也可以。如果做真核，直接酶切下来再连入真核载体就可以了。比较方便使用的。谢谢啦！
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5楼2012-08-16 16:58:39
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