24小时热门版块排行榜    

查看: 4440  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

神经再生

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] Western blot 有没有大仙做过Cleaved caspase-3(17kD),求操作经验啊!

Western blot 有没有大仙做过Cleaved caspase-3(17kD),求心得,求经验!
回复此楼
也许似乎大概是,然而未必不见得。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乖乖宝贝

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 神经再生 at 2012-11-29 12:32:40
cells signal现在能做的出来,但是偶尔会出很不好看的条带,很惆怅
15%胶电泳,湿转100V100min-2h都是可以的...

我想问下,湿转100V,100min ,做出来的是17KD一个条带,还是35和17一起出来了。同时想问下,出现Pro cleaved caspase-3  与药物作用的时间有关系吗?最近我也在做,35KD很容易就出条带了,但是17KD的老是出不来。
尽自己最大的努力,优秀毕业!
9楼2013-02-19 14:06:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

zjutheone

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
神经再生: 金币+10, ★★★很有帮助, 不错! 2012-10-10 22:22:47
常规操作,胶用12%是没问题的,30微克的上样量,100V,湿转1小时就可以了。
western时,测定cleaved caspase-3,total caspase-3和β-actin都要做。
2楼2012-10-09 17:16:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15929819216

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
看天: 金币+3, 新 鼓励 常来 2012-10-12 14:25:56
请问一下,你用什么仪器,是Bio-Red 吗,你100V恒压转时,电流是多大的,敬待回音。。。
3楼2012-10-12 13:35:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

david0308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
神经再生: 金币+5 2013-04-05 11:14:00
一般来说你的分子量较小,可以考虑一下小分子胶。如果不会的话其实12%或者15%的胶也可以,90V15min后再120V不超过一个小时,转膜的时候横流两个小时就好,然后膜要用0.2um孔径的,别用0.45的,要不可能会转出去。
哈哈
4楼2012-10-16 20:30:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123!
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见