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yxperfect

新虫 (初入文坛)

[求助] 14kd的蛋白,做westernblot,电转条件是怎样的

小分子量蛋白,14kd,1.5mm的胶
电转条件:250mA,湿转,3h30min。
结果只能看到最小分子量26kd的预染Marker,其他大分子量的marker还是看得很清晰的。
是不是转过了啊,,,怎么调整条件,胶有点厚。
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废哥117

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-09-01 21:07:16
14KD,用15%的胶,你的转膜条件没问题,湿转不存在转过的问题,如果只能看到20KD的条带,那可能是你电泳跑过了,像这种小分子量的蛋白,要注意电泳的条件和时间
不断提高自己
7楼2012-09-01 16:55:08
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废哥117

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

14KD,用15%的胶,你的转膜条件没问题,湿转不存在转过的问题,如果只能看到20KD的条带,那可能是你电泳跑过了,像这种小分子量的蛋白,要注意电泳的条件和时间
不断提高自己
8楼2012-09-01 16:55:37
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