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丙二醛MDA的测定问题
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丙二醛MDA测定找到两种方法但不知道哪种合适，请高手给看看： 第一种： （一）试剂配制 20%TCA：100g 三氯乙酸 → 500mL 0.67%TBA：3.35g硫代巴比妥酸 → 500ml 20%TCA （避光） (二)丙二醛比活力的测定 0.5ml酶液（对照用0.5ml的0.05mol/L pH=7.8的磷酸缓冲液代替酶液）+ 3mlTBA―振荡―沸水浴上反应30min―冷却（至少30min）离心（10000rpm,10min）―比色（OD600、OD532、OD450）。 第二种： 1、试剂配制： 10%TCA：100g 三氯乙酸 → 1L 0.67%TBA：3.35g硫代巴比妥酸 → 500ml 10%TCA （避光） 2、测定步骤: 0.2 样品+1.6ml 10%TCA 研磨→12000g 离心 10min →上清1.5ml +1.5 0.67% TBA →沸水煮30min →冷却，离心→上清OD450，OD532，OD600 这两种方法基本一样，但区别就在于样品需不需要加TCA来研磨？如果不需要加TCA这样测定所用的酶液和测SOD、CAT的一样了可以省下不少时间，如果需要加入TCA研磨来制酶液就要全部重新研磨很费时间，请高手给说说样品到底需不需要加TCA研磨？为什么？ |
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7楼2016-03-16 16:08:13