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mmzhang

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[求助] shRNA有关的问题

本人最近要做RNAi，计划用shRNA来做，以前没有做过，实验室里也没人会，所以想请教大家以下几个问题：
1、应该选择怎样插入的那段序列，同源性低的还是重要的功能域？
2、多长的片段比较合适呢？老板说200bp左右，但是有些方法里说20多个核苷酸？
3、引物设计有什么特殊要求吗？

请各位大侠指点迷津！谢谢！

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1楼 2012-08-11 12:42:43

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tinyys

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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mmzhang: 金币+5, ★有帮助 2012-08-13 16:08:47

做RNAi一般有两种方式，一种是体外合成dsRNA(双链RNA），这种RNA长度一般是300到500bp，dsRNA导入到目标内就被dicer切割成了siRNA，大概是22-25bp,就是20多个核苷酸。
另一种就是直接合成siRNA，然后导入目标内。看你选用的方法了。
引物设计的话，你可以去分子生物学区看资源帖，有详细解说。

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成长总是伴随一些无奈的

2楼2012-08-13 08:44:36

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