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汕头大学海洋科学接受调剂
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jsh209

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于RNAi的一个简单的问题

各位虫友们，我想请教2个问题，希望各位不吝赐教；
1.在植物表达干扰载体上，干扰序列之前放2个35S的启动子可以么？
2.干扰载体中,正向和反向链之间的那段序列有特异性的要求么？是不是只要随便一段500-700bp的序列就可以了。（水稻中）
谢谢了！！！
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1楼 2011-05-16 12:11:23
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shaquila

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-05-16 16:57:42
有啊，一般不能用欧联系20个碱基与其它基因序列匹配，特异性越高，脱靶几率越小吧～～
我的目的片段没有那么大，只有150左右，为啥一定要500-700呢？
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2楼2011-05-16 15:23:10
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-05-17 16:55:15
jsh209(金币+1): 问题自己已解决~谢谢 2011-05-20 22:25:38
引用回帖:
Originally posted by jsh209 at 2011-05-16 12:11:23:
各位虫友们，我想请教2个问题，希望各位不吝赐教；
1.在植物表达干扰载体上，干扰序列之前放2个35S的启动子可以么？
2.干扰载体中,正向和反向链之间的那段序列有特异性的要求么？是不是只要随便一段500-700bp的 ...

你为什么要放两个35S的启动子呢？
干扰的序列不是随便设置的，有软件可以设。不是随便的片段
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
3楼2011-05-16 18:31:37
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beautybanana

木虫 (著名写手)
自己可以试试看嘛~不做实验又怎么知道呢，大不了做下实验求证一下啊，这样不是更好嚒~有什么样结果做完实验自己就知道了，而且还会增加你对问题本身的认识程度，比别人回答你的要深刻多了~加油啊
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4楼2011-05-16 18:59:00
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shaquila

金虫 (正式写手)
内容已删除
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5楼2011-05-17 11:31:03
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jsh209

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by beautybanana at 2011-05-16 18:59:00:
自己可以试试看嘛~不做实验又怎么知道呢，大不了做下实验求证一下啊，这样不是更好嚒~有什么样结果做完实验自己就知道了，而且还会增加你对问题本身的认识程度，比别人回答你的要深刻多了~加油啊

额，先谢谢你啦。我就是已经做了 怕出错啦~~
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6楼2011-05-20 17:02:23
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jsh209

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-05-16 15:23:10:
有啊，一般不能用欧联系20个碱基与其它基因序列匹配，特异性越高，脱靶几率越小吧～～
我的目的片段没有那么大，只有150左右，为啥一定要500-700呢？

你可能理解错了，目的片段我是特异的，可是我是指连接到中间载体上的正向很反向序列之间的载体序列是否有特异性~~
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7楼2011-05-20 18:21:27
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shaquila

金虫 (正式写手)
我不知道你的载体，我的载体中间是内含子，会切除的
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8楼2011-05-20 19:08:07
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jsh209

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-05-20 19:08:07:
我不知道你的载体，我的载体中间是内含子，会切除的

哦 问题已经解决了， 我以为我把载体构建错了，一夜回到了解放前，回头一看虚惊一场···谢谢
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9楼2011-05-20 19:11:14
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