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急!求助!设计pcr含两个简并碱基,测序要增加内引物!不太懂,哪位高手指点下!
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求助:参照别人的文献设计pcr含两个简并碱基!条带已扩增出来,下面要测序,文献中说测序除本身pcr引物外要增加内引物,里面包含四条引物,在测序的时候是将其中的一对,还是加520F、624F和682R或813R中的三条。昨天给测序公司发了封咨询的邮件,回复说一次测序只能加一条引物。小弟是新手,望高人给下指点,不胜感激! Purified fragments were directly sequenced with the BigDye Terminator Cycle Sequencing kit (Applied Biosystems, Foster, CA,USA) using the same primers as for PCR plus additional internal sequencing primers 520F (50-GAAYAAGTAT GGTCGTCC), 624F (50-CAGCCATTTATGCGTTGGA-30), 682R (50-CTCCARCGCATAGGCTG) or 813R(50-GTGAATCCTCCWGTTAAGTA-30) and finally analyzedon the ABI PRISM377 DNA Sequencer. |
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2楼2012-12-21 17:23:32










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流光2012
谢谢您!