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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助啊，PCR高手求解啊....
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guoxinkun1

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助啊，PCR高手求解啊....

我用rtaq酶p我的目的产物，条带大小都对，就是很细，弯弯的像月牙，也没法回收，这是哪个环节出了问题，求助啊，我可能说不清楚，所以截了两张图...谢谢啊..
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勇往直前
1楼 2012-08-06 22:39:05
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wq123good

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流将有 2012-08-07 15:39:59
建议多加点电泳液，确保胶完全浸没，还要确保上样孔中没有气泡，电压可以低一点，慢慢跑
感觉你PCR的过程没有问题，可以把上样量降低一点
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过好每一天
6楼2012-08-07 11:18:28
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-08-07 15:39:25
能否可以上传完整的图？结果是就它一条带，还是有许多的杂带？
还有你的程序是怎么设置的？
你可以做一个温度梯度，在引物的TM左右5度的样子，多P几管试试。
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2楼2012-08-07 08:53:10
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guoxinkun1

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gelois at 2012-08-07 08:53:10
能否可以上传完整的图？结果是就它一条带，还是有许多的杂带？
还有你的程序是怎么设置的？
你可以做一个温度梯度，在引物的TM左右5度的样子，多P几管试试。

旁边的是maker，没有咋带，就是我的目的条带，我的退火温度就是低5到6度啊，
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勇往直前
3楼2012-08-07 10:45:58
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青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种情况我之前常遇到过，应该是你做的胶的问题或电泳液是不是该换了。还有制胶的TAE重新换一下吧~
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生命即这般无尽变数，辗转来去皆苛求不得
4楼2012-08-07 10:49:07
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