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guoxinkun1

金虫 (初入文坛)

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[求助] 求助啊，PCR高手求解啊....

我用rtaq酶p我的目的产物，条带大小都对，就是很细，弯弯的像月牙，也没法回收，这是哪个环节出了问题，求助啊，我可能说不清楚，所以截了两张图...谢谢啊..

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勇往直前

1楼 2012-08-06 22:39:05

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gelois

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助，热心的虫虫 2012-08-07 15:39:47
amisking: 回帖置顶 2012-08-09 19:48:40

如果你PCR环节没有出现问题的话，那么有可能就是跑胶的环节的问题了。
看你旁边的MARKER，条带也比较暗，是否可以适当的增加上样量。或者在配胶的时候EB适当的多加一些。
至于你跑出来的条带异常像月牙，原因有很多啊。。。有可能是，上样量过大或过小；核酸样品纯度差，含有DNA结合蛋白或高浓度的盐份；电泳缓冲液未完全浸没凝胶；电压过高或电泳时间过长致使凝胶过热和DNA变性；凝胶中加入EB造成染色不均；凝胶中有气泡或污染物；点样孔质量差……