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如何确定pcr产物是目的片段
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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雪强爱信
新虫
(初入文坛)
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虫号: 1515177
注册: 2011-11-29
专业: 病原细菌与放线菌生物学
[
求助
]
如何确定pcr产物是目的片段
本人也是新手一个,最近扩一段600bp左右的基因片段,但通过琼脂糖凝胶电泳检测pcr产物,是一条大于250bp明显不到600bp的条带,特异性特别好,条带很亮!不知道是不是自己想要的目的片段。求高手指点,谢谢各位。
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1楼
2012-08-06 09:31:53
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84146922
金虫
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帖子: 245
在线: 114.5小时
虫号: 1888599
注册: 2012-07-11
性别: GG
专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
设计引物进行PCR之后,确认完毕,再进行测序,确保序列正确
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9楼
2012-08-06 15:32:29
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wygcsu
木虫
(小有名气)
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帖子: 163
在线: 133.2小时
虫号: 797755
注册: 2009-06-23
专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
可以去测序,然后和你的目的序列比对!!!
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2楼
2012-08-06 09:36:01
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涌动的泉
铜虫
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注册: 2011-05-13
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MM
专业: 空间生物学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流
2012-08-06 15:22:51
如果设计引物时,软件上给出的产物片段是600bp的话,现在跑出来的片段明显不是你要的,你的经费充足的话到也可以像楼上说的去测一下,回来比对,否则就重设几对特异性好的引物重新做吧,或者跑个梯度PCR看看不同温度的结果是否一样
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我们的过去,成就了如今的我们,无需悔恨
3楼
2012-08-06 09:44:50
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healy13
禁虫
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4楼
2012-08-06 10:27:50
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