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dhmdddd木虫 (正式写手)
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SDS-PAGE蛋白胶咨询
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一个蛋白胶让实验室的人都崩溃了……样品攒了N多，蛋白胶做了一周还是没有做好……先说下配置蛋白胶的试剂吧，AC浓度是30%，这个是买的，分离胶和浓缩胶的TRIS-HCL，10%SDS，都是新配置的。之前胶是凝的比较慢，可能是因为我们的过硫酸铵受潮了，影响，然后我们每次都是加大过硫酸铵和TEMED的添加量，胶还好，能跑。最近一周做胶就是下午做好胶，放在水里，第二天就会变成图片中的样子……里面白色是颗粒状的东西，像盐粒，分离胶应该是有一定的硬度，比较脆一点，可是这样的分离胶出来很软，和浓缩胶有点像，甚至比浓缩胶更软……大家说这个只是因为过硫酸铵的问题吗？之前也是用的这个过硫酸铵，添加量加倍的话是可以的，怎么现在会是这个样子？请给位高手指教，谢谢~~ 白色的东西就是像盐粒一样的东西  |
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10楼2012-10-18 23:21:42
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APS现配现用最好，或者一次配置分装保存于-20度备用。 胶现配现用。TEMED和APS就按照标准量加即可，稍微多一点也是可以的，太多容易造成烧胶。 如果找不到原因，最好的办法就是把所有的试剂全部换新的，这样是最快的解决问题的办法，我们原来也遇到过类似问题，找了很长时间几乎所有试剂都换找原因，其实还不如一次解决，全新的就OK了。 |
4楼2012-08-03 11:09:36