24小时热门版块排行榜    

查看: 2677  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE蛋白胶咨询

一个蛋白胶让实验室的人都崩溃了……样品攒了N多,蛋白胶做了一周还是没有做好……先说下配置蛋白胶的试剂吧,AC浓度是30%,这个是买的,分离胶和浓缩胶的TRIS-HCL,10%SDS,都是新配置的。之前胶是凝的比较慢,可能是因为我们的过硫酸铵受潮了,影响,然后我们每次都是加大过硫酸铵和TEMED的添加量,胶还好,能跑。最近一周做胶就是下午做好胶,放在水里,第二天就会变成图片中的样子……里面白色是颗粒状的东西,像盐粒,分离胶应该是有一定的硬度,比较脆一点,可是这样的分离胶出来很软,和浓缩胶有点像,甚至比浓缩胶更软……大家说这个只是因为过硫酸铵的问题吗?之前也是用的这个过硫酸铵,添加量加倍的话是可以的,怎么现在会是这个样子?请给位高手指教,谢谢~~

白色的东西就是像盐粒一样的东西


回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

上班族,学习ing……
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dhmdddd: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-08-03 11:42:10
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助,积极解答问题 2012-08-03 13:59:12
dhmdddd: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-08-04 13:08:28
APS现配现用最好,或者一次配置分装保存于-20度备用。
胶现配现用。TEMED和APS就按照标准量加即可,稍微多一点也是可以的,太多容易造成烧胶。
如果找不到原因,最好的办法就是把所有的试剂全部换新的,这样是最快的解决问题的办法,我们原来也遇到过类似问题,找了很长时间几乎所有试剂都换找原因,其实还不如一次解决,全新的就OK了。
4楼2012-08-03 11:09:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

ankang0910

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dhmdddd: 金币+1 2012-08-03 11:35:05
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-27 15:50:47
TRIS-HCL的pH值配的对吗?过硫酸铵如果有问题应该影响丙烯酰胺的交联,胶的凝固。有颗粒是不是什么试剂没溶好?不行就制好胶就马上跑胶。不要放水里过夜。
实验顺利!!
2楼2012-08-03 10:31:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-03 13:58:55
没有遇到过这样情况,可能是AP的问题。为防止AP受潮,可以一次配好分装冻存在-20度,其它固体试剂要密封低温保存。TMED也不宜过量,会影响胶的交联和韧性。配好的胶,可以用保鲜膜封好后放于4度,最好不要长时间放于水中。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-08-03 10:47:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-03 11:09:36
APS现配现用最好,或者一次配置分装保存于-20度备用。
胶现配现用。TEMED和APS就按照标准量加即可,稍微多一点也是可以的,太多容易造成烧胶。
如果找不到原因,最好的办法就是把所有的试剂全部换新的,这样是最快 ...

什么事烧胶?我们的APS新的还没有到,别的试剂都已经是新的了。TEMED和APS加的量是挺多的,加少了胶不凝……等APS过来了再重新做胶试试看。
上班族,学习ing……
5楼2012-08-03 11:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +4 CrisMessi 2026-08-18 4/200 2026-08-19 00:53 by gatelove
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
请填处理意见