24小时热门版块排行榜    

查看: 1340  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

[求助] Southern求助

各位大侠,小弟初做Southern,用的是罗氏的地高辛试剂盒(CSPD),用柯达4000MM的CCD成像系统,化学发光成像,可是在显色的时候整个尼龙膜+都是亮的,看不到任何条带和斑点,如图,请大家帮我分析一下原因吧,我都是按照说明说上来做的,是不是有什么地方没注意到。谢谢了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

不抛弃,不放弃!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

各位大侠,我现在初学做southern blot,罗氏地高辛检测试剂盒(CSPD),尼龙+膜,用KODAK Image Station 4000MM 来检测,现在在做探针标记效率的确定,包括试剂盒里的DIG标记的对照DNA在内,还有我的探针,化学发光成像检测什么都看不到,只有雪花般的图,没有任何成像。然后还压了X光片,曝光半小时,也是什么都没有。求助,请问大家,除了用这个试剂盒里的试剂做southern,还需要别的试剂吗,比如抗体之类的?
标记效率做了几次了,结果都是什么没有,我都是按照说明书上的操作说明来做的,不知道原因在哪,还是我有些需要注意的地方没做到,请大家给支支招吧。
还有就是请问使用4000MM可以用来检测southern CSPD的结果吗?有哪位用这个仪器,求指教。
谢谢。





不抛弃,不放弃!
5楼2012-07-20 11:53:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能你的机器调的不对。曝光时间太长了。
coasttocoast。
2楼2012-07-19 07:54:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

谢谢,我的曝光时间5分钟。
另外我在不开启EPI的情况下,没有任何曝光图像出现,只是一片雪花,这是什么问题呢。做探针标记效率检测的时候有什么要注意的吗?
谢谢
不抛弃,不放弃!
3楼2012-07-19 12:46:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

在做southern,采用落实的化学发光试剂盒,先做了探针标记效率的确定实验,上成像仪检测,什么都没有,全是雪花,请问各位帮我分析一下原因吧。
不抛弃,不放弃!
4楼2012-07-19 14:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-31 01:16 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-31 00:54 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-31 00:32 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-30 20:30 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:08 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:23 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:51 by hZiFeudZyoGR
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:20 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 17:25 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见