24小时热门版块排行榜    

查看: 1420  |  回复: 10

elalei1999

铜虫 (小有名气)

[求助] Southern求助

各位大侠,小弟初做Southern,用的是罗氏的地高辛试剂盒(CSPD),用柯达4000MM的CCD成像系统,化学发光成像,可是在显色的时候整个尼龙膜+都是亮的,看不到任何条带和斑点,如图,请大家帮我分析一下原因吧,我都是按照说明说上来做的,是不是有什么地方没注意到。谢谢了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

不抛弃,不放弃!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能你的机器调的不对。曝光时间太长了。
coasttocoast。
2楼2012-07-19 07:54:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

谢谢,我的曝光时间5分钟。
另外我在不开启EPI的情况下,没有任何曝光图像出现,只是一片雪花,这是什么问题呢。做探针标记效率检测的时候有什么要注意的吗?
谢谢
不抛弃,不放弃!
3楼2012-07-19 12:46:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

在做southern,采用落实的化学发光试剂盒,先做了探针标记效率的确定实验,上成像仪检测,什么都没有,全是雪花,请问各位帮我分析一下原因吧。
不抛弃,不放弃!
4楼2012-07-19 14:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

各位大侠,我现在初学做southern blot,罗氏地高辛检测试剂盒(CSPD),尼龙+膜,用KODAK Image Station 4000MM 来检测,现在在做探针标记效率的确定,包括试剂盒里的DIG标记的对照DNA在内,还有我的探针,化学发光成像检测什么都看不到,只有雪花般的图,没有任何成像。然后还压了X光片,曝光半小时,也是什么都没有。求助,请问大家,除了用这个试剂盒里的试剂做southern,还需要别的试剂吗,比如抗体之类的?
标记效率做了几次了,结果都是什么没有,我都是按照说明书上的操作说明来做的,不知道原因在哪,还是我有些需要注意的地方没做到,请大家给支支招吧。
还有就是请问使用4000MM可以用来检测southern CSPD的结果吗?有哪位用这个仪器,求指教。
谢谢。





不抛弃,不放弃!
5楼2012-07-20 11:53:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

弱问:罗氏DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II,有有效期吗?
不抛弃,不放弃!
6楼2012-07-23 17:01:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ningxiao7308

铜虫 (小有名气)

敢问楼主这个问题解决了吗
7楼2012-07-24 10:23:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

长青树

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

回五楼的话,肯定有有效期的,如果放在-20度保存,估计问题不会太大的。
8楼2012-07-24 12:36:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

难道是我的在运输过程中失效了??无解啊。
不抛弃,不放弃!
9楼2012-07-25 17:06:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangmanglulu

金虫 (小有名气)

内容已删除
10楼2013-07-09 09:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 elalei1999 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 5/250 2026-11-11 17:58 by TgvkbZZl9tqB
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 3/150 2026-11-11 17:42 by TgvkbZZl9tqB
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 4/200 2026-11-11 17:33 by TgvkbZZl9tqB
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-11 17:31 by TgvkbZZl9tqB
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-11 17:25 by TgvkbZZl9tqB
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-11 17:20 by TgvkbZZl9tqB
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 17:14 by TgvkbZZl9tqB
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 17:03 by TgvkbZZl9tqB
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 3/150 2026-11-11 15:43 by TgvkbZZl9tqB
[基金申请] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 4/200 2026-11-11 15:13 by TgvkbZZl9tqB
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 7/350 2026-11-11 13:31 by cdqGD6ftHmbl
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 3/150 2026-11-11 11:41 by gRND4NVAZ8VG
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 10:32 by 1Nb0IVlmV6v0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 10:26 by 1Nb0IVlmV6v0
[考博] 27博士申请 +3 白白白ly 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:39 by szq0819
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
信息提示
请填处理意见