24小时热门版块排行榜    

查看: 1403  |  回复: 10

elalei1999

铜虫 (小有名气)

[求助] Southern求助

各位大侠,小弟初做Southern,用的是罗氏的地高辛试剂盒(CSPD),用柯达4000MM的CCD成像系统,化学发光成像,可是在显色的时候整个尼龙膜+都是亮的,看不到任何条带和斑点,如图,请大家帮我分析一下原因吧,我都是按照说明说上来做的,是不是有什么地方没注意到。谢谢了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

不抛弃,不放弃!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能你的机器调的不对。曝光时间太长了。
coasttocoast。
2楼2012-07-19 07:54:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

谢谢,我的曝光时间5分钟。
另外我在不开启EPI的情况下,没有任何曝光图像出现,只是一片雪花,这是什么问题呢。做探针标记效率检测的时候有什么要注意的吗?
谢谢
不抛弃,不放弃!
3楼2012-07-19 12:46:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

在做southern,采用落实的化学发光试剂盒,先做了探针标记效率的确定实验,上成像仪检测,什么都没有,全是雪花,请问各位帮我分析一下原因吧。
不抛弃,不放弃!
4楼2012-07-19 14:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

各位大侠,我现在初学做southern blot,罗氏地高辛检测试剂盒(CSPD),尼龙+膜,用KODAK Image Station 4000MM 来检测,现在在做探针标记效率的确定,包括试剂盒里的DIG标记的对照DNA在内,还有我的探针,化学发光成像检测什么都看不到,只有雪花般的图,没有任何成像。然后还压了X光片,曝光半小时,也是什么都没有。求助,请问大家,除了用这个试剂盒里的试剂做southern,还需要别的试剂吗,比如抗体之类的?
标记效率做了几次了,结果都是什么没有,我都是按照说明书上的操作说明来做的,不知道原因在哪,还是我有些需要注意的地方没做到,请大家给支支招吧。
还有就是请问使用4000MM可以用来检测southern CSPD的结果吗?有哪位用这个仪器,求指教。
谢谢。





不抛弃,不放弃!
5楼2012-07-20 11:53:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

弱问:罗氏DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit II,有有效期吗?
不抛弃,不放弃!
6楼2012-07-23 17:01:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ningxiao7308

铜虫 (小有名气)

敢问楼主这个问题解决了吗
7楼2012-07-24 10:23:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

长青树

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

回五楼的话,肯定有有效期的,如果放在-20度保存,估计问题不会太大的。
8楼2012-07-24 12:36:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elalei1999

铜虫 (小有名气)

难道是我的在运输过程中失效了??无解啊。
不抛弃,不放弃!
9楼2012-07-25 17:06:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mangmanglulu

金虫 (小有名气)

内容已删除
10楼2013-07-09 09:06:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 elalei1999 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们,看完中央《从严治党》的决定后,对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
请填处理意见