| 查看: 4621 | 回复: 6 | |||
马龙sweeting木虫 (正式写手)
|
[求助]
请问贴壁细胞用什么固定液固定、固定多长时间~~
|
| 请问贴壁细胞用什么固定液固定、固定多长时间~~我固定后是要进行染色检测凋亡和坏死~~查文献有在染完色再固定的，用的是甲醇和冰醋酸~~但不知道固定多长时间~~请高手指教~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
南京大学化学调剂
已经有11人回复
-
材料专硕调剂
已经有5人回复
-
一志愿华东师范大学有机化学专业，初试351分，复试被刷求调剂!
已经有5人回复
-
283求调剂（080500）
已经有7人回复
-
311求调剂
已经有6人回复
-
275求调剂
已经有20人回复
-
各位老师好，我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕
已经有9人回复
-
294分080500材料科学与工程求调剂
已经有8人回复
-
一志愿北京工业大学，324分求调剂
已经有5人回复
-
一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 组织块贴壁法培养细胞如何做？
已经有7人回复
- 培养的HeLa细胞一直不能贴壁生长，求原因
已经有5人回复
- 贴壁细胞培养时为什么边缘不清
已经有12人回复
- 混合细胞系怎么养？悬浮和贴壁的都有
已经有4人回复
- 电镜观察中空膜上细胞的贴壁情况
已经有4人回复
- 【求助/交流】293T细胞里面有小颗粒，细胞不贴壁，无法继续培养
已经有12人回复
- 【求助/交流】怎样才能使贴壁细胞的细胞悬液能够高活性的保存长时间呢？
已经有4人回复
- 【求助】免疫组化
已经有13人回复
- 【求助/交流】贴壁细胞复苏死了
已经有8人回复
- 【求助/交流】4% 多聚甲醛作为固定液的具体使用方法
已经有7人回复
- 【求助/交流】骨髓基质细胞不贴壁可能的原因
已经有6人回复
- 100金币求微藻光反应器细胞贴壁问题！很急很急！
已经有8人回复
yangliguo007
木虫 (著名写手)
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4828
- 散金: 36
- 红花: 12
- 帖子: 1328
- 在线: 741.5小时
- 虫号: 874624
- 注册: 2009-10-16
- 性别: GG
- 专业: 中药药效物质
2楼2012-07-10 21:20:29
3楼2012-07-11 17:08:16
zwzlysh
金虫 (小有名气)
- 应助: 35 (小学生)
- 金币: 1047.2
- 散金: 63
- 红花: 5
- 帖子: 146
- 在线: 90.7小时
- 虫号: 1704326
- 注册: 2012-03-20
- 性别: MM
- 专业: 食品加工技术
4楼2012-07-11 17:16:02
dongxie1982
铜虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 69.9
- 红花: 1
- 帖子: 335
- 在线: 95.9小时
- 虫号: 1514344
- 注册: 2011-11-28
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
5楼2012-07-13 16:03:29
马龙sweeting
木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 2102.1
- 散金: 36
- 红花: 5
- 帖子: 506
- 在线: 55.5小时
- 虫号: 1319416
- 注册: 2011-06-10
- 专业: 细胞信号转导
6楼2012-08-07 15:19:25
cccssszzz08
木虫 (正式写手)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 5
- 散金: 2095
- 红花: 5
- 帖子: 469
- 在线: 136.1小时
- 虫号: 1281854
- 注册: 2011-04-30
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
|
我们这里测凋亡和坏死的时候一般都是双染法测的。PI和AnexinV 大概的步骤是 1、调整待检测细胞浓度为106个/ml，取200ul， 1000rpm×5min(4℃)。 2、预冷的PBS1ml 润洗两次2，1000rpm×5min(4℃)。 3、将细胞重悬于100ul binding buffer，加入2ulAnnexin-V-FITC(20ug/ml)，轻轻混匀，避光冰上放置15分钟。 4、转至流式检测管，加入400ulPBS，每个样品临上机前加入1ulPI（50ug/ml），2分钟后迅速检测。 5、同时以不加Annexin V-FITC 及PI 的一管作为阴性对照。 这里说的PBS洗 就是直接在贴壁的情况下，然后就会传代的时候用PBS洗是一样的。 |
7楼2012-08-07 22:20:56
5