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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

[求助] 请问贴壁细胞用什么固定液固定、固定多长时间~~

请问贴壁细胞用什么固定液固定、固定多长时间~~我固定后是要进行染色检测凋亡和坏死~~查文献有在染完色再固定的,用的是甲醇和冰醋酸~~但不知道固定多长时间~~请高手指教~~
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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yangliguo007 at 2012-07-10 21:20:29
不明白你什么意思,检测凋亡的话一般用PI染色,然后流式细胞仪检测,具体步骤为:
1、收集细胞;
2、用PBS洗3次;
3、离心,去上清,之后加500ulPBS重选,之后加入10ml70%乙醇于-20℃固定过夜;
4、离心,去乙醇 ...

请问您说的PBS洗3次是怎么洗~~是将细胞重悬后,10000r,离心5min,再收集沉淀,这样算一次洗涤~~还是就是加入PBS,在不是细胞飘起来的情况下,浸泡一下细胞团块儿呢~~
6楼2012-08-07 15:19:25
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yangliguo007

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+2, 鼓励分享和交流 2012-07-10 23:51:57
不明白你什么意思,检测凋亡的话一般用PI染色,然后流式细胞仪检测,具体步骤为:
1、收集细胞;
2、用PBS洗3次;
3、离心,去上清,之后加500ulPBS重选,之后加入10ml70%乙醇于-20℃固定过夜;
4、离心,去乙醇,加入PI(含RNase),4℃避光孵育30min,之后上机检测
物竞天择,适者生存。
2楼2012-07-10 21:20:29
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蓝天_1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+2, 鼓励新虫发帖交流 2012-07-12 09:38:27
4%的多聚甲醛15min;甲醇好像是1h,记得不是很清楚。建议用多聚甲醛。
3楼2012-07-11 17:08:16
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zwzlysh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流 2012-07-12 09:38:37
建议用AO-EB双染色,细胞不需要固定,染出来的效果也非常好,凋亡细胞和正常细胞区别明显。
4楼2012-07-11 17:16:02
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