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构建载体,目的基因容易发生SNP,但是699bp有10个之多,是不是有问题,太多了吧?
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btx362237729
金虫
(正式写手)
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虫号: 1069351
[交流]
构建载体,目的基因容易发生SNP,但是699bp有10个之多,是不是有问题,太多了吧?
从cDNA做PCR,好不容易连上了,但是测序发现有10个序列不对,查到这个基因很容易出现SNP(单核苷酸多态性),去NCBI的SNP数据库查但是看不懂结果。
求高人指导,万分感谢!!!!!!!!!
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2012-07-08 01:11:48
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btx362237729
金虫
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14楼
:
Originally posted by
liuluscl
at 2012-07-10 14:52:31
takara premix 是taq酶吧,没记错的话,保真度不高,一般做PCR鉴定用那个,做克隆或做snp还是用高保真的pfu比较好吧
保真度不高 也不至于699bp就出10个突变,之前做过400bp的 一点问题都没有。而且这10个突变点在前200bp就出现了,所以肯定不是酶的问题
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20楼
2012-08-06 13:26:24
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sesame_oil
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btx362237729(金币+1): 谢谢参与
太专业了。
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2012-07-08 06:30:20
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btx362237729(金币+1): 谢谢参与
我也是刚学分子生物学,得多学习啦
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3楼
2012-07-08 09:39:15
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木虫
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btx362237729(金币+1): 谢谢参与
比较一下蛋白质序列看看有多少突变了?
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5楼
2012-07-08 13:18:11
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