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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 构建载体，目的基因容易发生SNP，但是699bp有10个之多，是不是有问题，太多了吧？
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btx362237729

金虫 (正式写手)

[交流] 构建载体，目的基因容易发生SNP，但是699bp有10个之多，是不是有问题，太多了吧？

从cDNA做PCR,好不容易连上了，但是测序发现有10个序列不对，查到这个基因很容易出现SNP（单核苷酸多态性），去NCBI的SNP数据库查但是看不懂结果。

求高人指导，万分感谢！！！！！！！！！
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1楼 2012-07-08 01:11:48
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btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by tupac225 at 2012-08-04 08:55:54
你用的什么酶？最好用高保真的pfu酶吧，虽然扩增效率没有普通的酶高，但是突变率很低，另外在切胶连接的时候，紫外的时间不要过长，如果真的这样，很麻烦的，祝你好运吧。

不可能是酶的问题 序列才这么短。。。也不会是紫外时间过长的问题 因为载体上已经构建好的一段目的基因完全正确   过多的SNP应该是正常发生的 NCBI SNP数据库上这段序列就给出了5个SNP位点
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19楼2012-08-06 13:25:03
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sesame_oil

荣誉版主 (文坛精英)
★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
太专业了。
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2楼2012-07-08 06:30:20
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)
★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
我也是刚学分子生物学，得多学习啦
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3楼2012-07-08 09:39:15
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木虫 (著名写手)
★
btx362237729(金币+1): 谢谢参与
比较一下蛋白质序列看看有多少突变了?
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5楼2012-07-08 13:18:11
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