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btx362237729

金虫 (正式写手)


[交流] 构建载体,目的基因容易发生SNP,但是699bp有10个之多,是不是有问题,太多了吧?

从cDNA做PCR,好不容易连上了,但是测序发现有10个序列不对,查到这个基因很容易出现SNP(单核苷酸多态性),去NCBI的SNP数据库查但是看不懂结果。

求高人指导,万分感谢!!!!!!!!!

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btx362237729

金虫 (正式写手)


引用回帖:
18楼: Originally posted by tupac225 at 2012-08-04 08:55:54
你用的什么酶?最好用高保真的pfu酶吧,虽然扩增效率没有普通的酶高,但是突变率很低,另外在切胶连接的时候,紫外的时间不要过长,如果真的这样,很麻烦的,祝你好运吧。

不可能是酶的问题 序列才这么短。。。也不会是紫外时间过长的问题 因为载体上已经构建好的一段目的基因完全正确   过多的SNP应该是正常发生的 NCBI SNP数据库上这段序列就给出了5个SNP位点
19楼2012-08-06 13:25:03
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查看全部 23 个回答

btx362237729(金币+1): 谢谢参与
太专业了。
2楼2012-07-08 06:30:20
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)



btx362237729(金币+1): 谢谢参与
我也是刚学分子生物学,得多学习啦
3楼2012-07-08 09:39:15
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547star

木虫 (著名写手)



btx362237729(金币+1): 谢谢参与
比较一下蛋白质序列看看有多少突变了?
5楼2012-07-08 13:18:11
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