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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，换了高保真酶扩不出来目的条带
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anoldhorse

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助，换了高保真酶扩不出来目的条带

我的目的产物是3600bp，原来用takara的LA HS可以扩出来，换了东洋纺的KOD Plus Neo怎么也扩不出来，求高手指点
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1楼 2012-07-01 14:48:59
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-02 14:00:44
鱼与熊掌不能兼得。
还是用LA taq，循环数减少。
重复PCR个20个管子。回收目标片段。
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5楼2012-07-01 18:55:13
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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by anoldhorse at 2012-07-01 21:22:37
谢谢，这是个不错的建议，主要是前一次用的LA扩的，可能因为循环太多（35个循环），连接到载体里面发生了突变成终止子了，现在也挺害怕突变了，...

我的原则是，首先要P出来，然后再保证序列正确，P不出来，再高保真都是浮云。
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10楼2012-07-02 09:03:53
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