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用天根琼脂糖回收试剂盒中的eb洗脱,会影响后续的连接转换,测序吗?
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eesing
金虫
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(幼儿园)
金币: 1186.3
帖子: 470
在线: 133.4小时
虫号: 1176581
[交流]
用天根琼脂糖回收试剂盒中的eb洗脱,会影响后续的连接转换,测序吗?
如题,载体为takara的pmd18-T,最近总长阳性菌很少,且概率低,谢谢各位了
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1楼
2012-06-30 11:58:47
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sd3824289
木虫
(正式写手)
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(小学生)
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帖子: 740
在线: 105.5小时
虫号: 1657712
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主最后一步最好用dd H2O来回收,用EB对后续的链接测序都会有影响的。如果后续不做链接的话,EB回收没有问题,强调一点,如果用水做回收的话,水的pH最好在7.0-7.5之间,否则会影响回收效率!
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25楼
2012-07-03 15:36:46
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xuejunwang
木虫
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虫号: 1337696
★
eesing(金币+1): 谢谢参与
理论上不影响,如果怀疑可以用超纯水直接洗脱啊,或将EB稀释几倍
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9楼
2012-06-30 14:18:59
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syn1985
木虫
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虫号: 463029
★
eesing(金币+1): 谢谢参与
我一般不用他自带的洗脱液 因为用这个洗脱液洗脱的PCR产物直接送公司测序会测不出来 不够我也见过他们直接用的 好像也没多大问题 我觉得连不上最大问题是浓度
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13楼
2012-06-30 15:06:11
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