24小时热门版块排行榜    

查看: 6043  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

WSW_Alone

木虫 (著名写手)

[求助] 试剂盒提取细菌DNA后,跑胶检测有条带,但是PCR后却无扩增产物。

如题,土壤筛选的菌,用试剂盒提取DNA后,跑胶检测(如图)有条带,进行16S rDNA PCR扩增,结果却没有。请教一下哪里出了问题?(注:上一批也是这么做的,大部分都跑出来了,不知道为何这次都没出来,条件什么的都一样)
体系是通用的,我用的引物是27f/1492r
扩增条件:94℃    5min
                94℃    45s
                56℃    45s
                72℃    90s
                 32个循环
          72℃    20min
求大神指导,不胜感激。

试剂盒提取DNA后直接跑胶检测结果



PCR产物跑胶结果
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

土壤微生物

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

處世樹為模,本固任從枝葉動;立身錢作樣,內方還要外邊圓。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZOEY21

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

同认为稀释模板。PCR跑胶那板还看得到DNA吧。估计含抑制PCR成分。
6楼2012-07-03 10:03:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 WSW_Alone 的主题更新
信息提示
请填处理意见