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ssdghf

铜虫 (小有名气)

[求助] 测定胃蛋白酶活力时候的问题

小弟最近测定胃蛋白酶的活力,在配置2%的酪蛋白溶液时候出现下面的问题:
用0.1mol/lNaOH溶液溶解,在加热的情况下能全溶,可是最后要求定容时用酸性缓冲液(pH=2.5),原先溶解的酪蛋白都成为絮状沉淀了,于是还是只能用酸性溶液溶解,可是在酸性清况下,无论如何它也不溶。。现在也在抓头中- -
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小蒋

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

pH=2.5时,你使用的酪蛋白已经变性了,所以聚集絮凝,建议改用改性过的酸性酪蛋白,这样的酪蛋白直接有的卖的
我想我会的。
9楼2013-05-30 18:34:24
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fhang0427

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
树树8013: 金币+2, 老虫友,老朋友。谢谢解答。版主奖励。 2012-06-27 22:36:37
酪蛋白的pI =4.6,pH=2.5时,当然酪蛋白聚集絮凝了
底物应该改变可采用变性酪蛋白、变性血球蛋白、FITC-酪蛋白或叠氮酪蛋白试试,这些都是测定蛋白水解活力常用底物,也可合成肽为底物进行分析
2楼2012-06-27 20:29:21
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ssdghf

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fhang0427 at 2012-06-27 20:29:21
酪蛋白的pI =4.6,pH=2.5时,当然酪蛋白聚集絮凝了
底物应该改变可采用变性酪蛋白、变性血球蛋白、FITC-酪蛋白或叠氮酪蛋白试试,这些都是测定蛋白水解活力常用底物,也可合成肽为底物进行分析

变性酪蛋白,是怎么变性的,有这种产品卖吗?它们在4.6就不沉淀吗?
3楼2012-06-28 10:28:50
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和龟赛跑的人

木虫 (小有名气)

请问你的缓冲液是乳酸缓冲液吗?那你的乳酸及乳酸钠是在哪买的,其含量是国标上的吗
4楼2013-05-06 10:31:47
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