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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 平末端连接，连上了，很多转化子中没有一个正确的，怎么办？
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zld629

木虫 (小有名气)

[求助] 平末端连接，连上了，很多转化子中没有一个正确的，怎么办？

在构建一个载体到了最后一步平末端连接，总是不成功。转化后长了不少菌，挑了100多那个，几乎整板都挑了，没有一个对的。怎么办？我用载体上片段做正引物、插入片段末端做反引物，做PCR，连接液有很亮的带，应该是有连上的了，为什么转化子中却没有？如何解决这个问题呢？
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1楼 2012-06-24 19:24:40
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ytetyio09

新虫 (正式写手)
可以试试这篇论文的方法，虽然是个小的改进，但是值得一试，而且很方便：
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24613256
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13楼2014-03-25 10:02:07
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ytetyio09

新虫 (正式写手)
14楼2014-03-25 16:07:41
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