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hraikeyan

金虫 (小有名气)

[求助] 简并引物需要加保护碱基吗

设计了简并引物,20个碱基。需要加保护碱基吗?
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nothing isimpossible
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hraikeyan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hyacinth326 at 2012-06-13 17:47:29
我感觉不用加,既然用兼并引物来p你应该是不知道基因的序列吧,不知道基因的序列咋酶切啊?不酶切就不用加保护碱基了啊,我觉得用兼并引物先把基因p下来然后连到载体上送测序确定基因的序列,再考虑酶切位点及保护碱 ...

同意,还有一个问题想请教:我设计的引物上游引物20个碱基,下游17个。这个相差大吗?还是说必须上下游要一样?
nothing isimpossible
6楼2012-06-13 19:12:20
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查看全部 8 个回答

chenyhok1987

银虫 (正式写手)

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我是加的,我感觉是引物都要加的,要不怎么好切下来呢~~~
平生多磨砺,男儿自横行!
2楼2012-06-13 12:33:20
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gywyl1977

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你肯定要克隆、测序的,当然要加保护碱基啦。
3楼2012-06-13 14:54:54
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你要不要酶切,只有酶切才需要保护碱基,其他就不一定要了。
4楼2012-06-13 17:00:36
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