应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 纤维素酶高产菌株筛选时的透明圈问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
231/3返回列表123下一页
查看: 4036  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

mc2840261

新虫 (初入文坛)

[求助] 纤维素酶高产菌株筛选时的透明圈问题

小弟在做纤维素酶高产菌株的诱变选育，采用羧甲基纤维素钠刚果红培养基，但是透明圈很不明显，基本上就比菌落大个1mm……想求助下各位大侠，到底是什么原因，有没有改进的方法，能让透明圈变的大点~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
其实不幸福，其实还爱她，只是无法说出口
1楼 2012-06-06 17:39:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)
mc2840261: 回帖置顶 2012-06-12 10:47:33
这是我当时用的培养基
羧甲基纤维素钠（CMC）培养基（参考察氏培养基，用羧甲基纤维素钠取代其中的蔗糖，通过观察培养基上的菌落生长情况以及水解圈的大小和清晰程度，并经反复试验后，最终确定羧甲基纤维素钠添加量为0.8%，并在其中添加适量氯霉素以抑制细菌和放线菌的生长，其余配方不变；CMC不易溶于水，在配制该培养基时，加入CMC后，需在80℃的水浴锅中加热2h并不断搅拌使CMC充分溶解。）
CMC  0.8% ，NaNO3  0.3%， KCl  0.05%， K2HPO4  0.1%，FeSO4  0.001%，
MgSO4•7H2O  0.05%， 琼脂 2%，氯霉素 0.005%，pH 6.0 ,115℃灭菌15min
刚果红实验步骤待所点菌种在CMC平板上长出可见菌落后，往平板里加入适量1mg/ml的刚果红溶液，染色1h后，弃去染色液，并同时用蒸馏水清洗，最后加入适量1mol/L的NaCl溶液，脱色1小时，观察水解圈直径与菌落直径的大小。
附件中试我当时做的图片
赞一下(6人) 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 新建 Microsoft Word 文档.doc
    • 2012-06-08 09:40:36, 1.08 M
分享信息，提高自己
11楼2012-06-08 09:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)
★
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖交流 2012-06-07 23:01:44
哥们，俺研究生就做和你一样的课题。
首先，在配置羧甲基纤维素培养基时，将羧甲基纤维素钠加入到培养基中然后加热至八十摄氏度，一直搅拌，直至羧甲基纤维素钠溶解为止。
其次，千万别在培养基中加刚果红，我也做过的，水解圈效果不明显，刚果红抑制微生物生长。
应该是在未加刚果红的培养基上培养微生物，待微生物菌落长大后，添加1mg/ml的刚果红溶液浸泡半个小时后，用NaCl溶液浸泡后，用蒸馏水冲洗，透明全就出来了
祝福你
赞一下(1人) 回复此楼
分享信息，提高自己
4楼2012-06-07 17:45:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

north_coco887

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖交流 2012-06-07 23:01:35
好像是利用纤维素酶扩散的原理，产酶量高，扩散的范围就大，会不会和琼脂浓度有关系呢？以前做过一点儿，后来不用了。不是降解CMC-Na的都能产纤维素酶。
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-07 14:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mc2840261

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by north_coco887 at 2012-06-07 14:09:46
好像是利用纤维素酶扩散的原理，产酶量高，扩散的范围就大，会不会和琼脂浓度有关系呢？以前做过一点儿，后来不用了。不是降解CMC-Na的都能产纤维素酶。

那这样的话，第一步的初筛就没办法进行着……琼脂的浓度是2%,应该影响不大吧，而且我做的如果刚果红的浓度太高的话，会抑制菌的生长，现在的主要问题就是透明圈很不明显，有没有什么解决的办法呢？
赞一下 回复此楼
其实不幸福，其实还爱她，只是无法说出口
3楼2012-06-07 15:24:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mc2840261

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yhjcwangyw at 2012-06-07 17:45:50
哥们，俺研究生就做和你一样的课题。
首先，在配置羧甲基纤维素培养基时，将羧甲基纤维素钠加入到培养基中然后加热至八十摄氏度，一直搅拌，直至羧甲基纤维素钠溶解为止。
其次，千万别在培养基中加刚果红，我也做 ...

首先很感谢你！但是你说的我做过了！染色法染不出来……所以才去用直接加到培养基里面的方法，我培养的是真菌，菌长呢，但是染色后不出现透明圈，刚果红的浓度一样，而且我染了1个小时呢，不过用Nacl后没有用水洗，这个会不会有影响呢？或者说我的那个步骤错了呢？ 能否帮我分析下呢？我实在是没办法了，拜托了！！
赞一下 回复此楼
其实不幸福，其实还爱她，只是无法说出口
5楼2012-06-07 21:15:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenjiangjin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖交流 2012-06-07 23:01:52
用氯仿熏蒸破坏细胞壁，让酶流出胞外，再保温，试试。
赞一下 回复此楼
6楼2012-06-07 21:37:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mc2840261

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhenjiangjin at 2012-06-07 21:37:35
用氯仿熏蒸破坏细胞壁，让酶流出胞外，再保温，试试。

虽然听起来有些困难，不过我去试试吧~多谢~
赞一下 回复此楼
其实不幸福，其实还爱她，只是无法说出口
7楼2012-06-07 23:04:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

506787376
8楼2012-06-08 00:00:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

two

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mc2840261: 金币+2, ★有帮助, 木办法了！估计就是菌的问题吧 2012-06-12 11:47:39
说明你的菌种不行呀，哥们儿！重筛吧！俺们就是直接筛，大的很呀。
赞一下 回复此楼
努力快乐着,但生活本不如意
9楼2012-06-08 09:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mc2840261 at 2012-06-07 21:15:46
首先很感谢你！但是你说的我做过了！染色法染不出来……所以才去用直接加到培养基里面的方法，我培养的是真菌，菌长呢，但是染色后不出现透明圈，刚果红的浓度一样，而且我染了1个小时呢，不过用Nacl后没有用水洗， ...

我当时也是培养的真菌（霉菌），首先你确定你培养的真菌能分解羧甲基纤维素钠吗，分解能力很强吗？如果培养的真菌不能分解羧甲基纤维素钠的话，你后面做的再好也不会出现透明圈的，其次你的培养基呢，一定要保证羧甲基纤维素钠完全溶于培养基中才行。
赞一下 回复此楼
分享信息，提高自己
10楼2012-06-08 09:32:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mc2840261 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 数二 英语一，求调剂，本科学校福建农林大学 +3 五峰尖 2026-03-29 3/150 2026-04-04 23:10 by zhyzzh
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-03 4/200 2026-04-04 22:17 by hemengdong
[考研] 295求调剂 +6 xndjjj 2026-04-04 6/300 2026-04-04 16:52 by dongzh2009
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +5 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-04 5/250 2026-04-04 16:31 by dongzh2009
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖！ 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 化学调剂求助 +6 LULONG1 2026-04-03 6/300 2026-04-03 23:13 by qzxyhcsy
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 英一数一408，总分284，二战真诚求调剂 +13 12.27 2026-03-30 15/750 2026-04-03 14:41 by 氮气气气
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
[考研] 313求调剂 +3 ～微微凉～ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 289求调剂 +4 Acesczlo 2026-03-29 5/250 2026-04-03 10:09 by 不168
[考研] 一志愿a区211，085601-307分求调剂 +13 党嘉豪 2026-03-31 26/1300 2026-04-03 08:33 by 495374996
[考研] 275学硕081000服从调剂到其他专业，保不住本专业了 +7 一只小小水牛 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:23 by alice-2022
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 11/550 2026-04-02 10:52 by lnilvy
[考研] 301求调剂 +8 axibli 2026-04-01 8/400 2026-04-01 09:51 by 我的船我的海
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +7 双马尾痞老板2 2026-03-31 7/350 2026-03-31 19:49 by Dyhoer
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[基金申请] 面上5B能上会吗？ +8 redcom 2026-03-29 8/400 2026-03-31 15:53 by niuailing
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭