应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 小分子蛋白电泳marker
161/2返回列表12下一页
查看: 2964  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

alert_pqs

新虫 (初入文坛)

[求助] 小分子蛋白电泳marker

以前电泳marker的条带还好，有6条，但现在，后面的3条基本看不清楚了，应该不是电泳时间过长而跑出去了，模模糊糊可以看清，像是扩散了，请各路大神指点，附图，谢谢！
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : SDC15551.JPG
    • 2012-05-28 22:58:07, 1.91 M

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白相关

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-28 22:58:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhaohq1209: 金币+5, 解答还是全面，学习啦~ 2012-05-30 10:34:13
zhaohq1209: 回帖置顶 2012-05-30 10:34:15
这个问题现象我以前好像见过的，可能有几个方面：
第一，你电泳时电压过高，我一般电泳时都是用很低的电压先跑个半小时，之后再加大到正常情况跑，放心不会扩散
第二，你胶没有制备好，或者没有充分凝和，这个不是很清楚是不是这个原因
第三，你染色时间稍微延长一点，最后洗脱再干净一点就差不多
赞一下(2人) 回复此楼
10楼2012-05-30 09:08:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
telomerase: 金币+3, 辛苦辛苦 2012-05-30 09:23:14
zhaohq1209: 金币+3, tricine是一种缓冲液吧，貌似在MOPS培养基中用过的 2012-05-30 10:33:47
引用回帖:
7楼: Originally posted by alert_pqs at 2012-05-29 22:27:40
1.7-40kDa，总共6条带，后面三条不知道怎么回事就弥散了，没用tricine-SDS-PAGE,直接用的Gly-SDS-PAGE,染色会有问题吗？我是用的考染，先固定30min，再60度10-15min，应该没问题吧，谢谢！...

那就是扩散了，Tricine-SDS-PAGE中的Tricine在电泳时具有浓缩样品的作用，让小分子样品在浓缩胶时用很好的浓缩效果，并且在分离胶时保持很窄的条带，用Gly代替Tricine就会出现10kDa以下的条带看不到或者很模糊的情况。
把电泳缓冲液换成Tricine试试吧
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

alert_pqs
关注我关注的
9楼2012-05-30 00:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新上图，看不到你的图。
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-29 12:33:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

废哥117

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看不到你的图啊，根据你的描述，有可能是你的电泳时间过长，不过如果你不是做小分子蛋白，这个没什么大影响的，还有就是你的marker上样多少，是不是上的少了，所以感觉不清晰，不过应该不影响结果，你再做个内参不就行了
赞一下 回复此楼
不断提高自己
3楼2012-05-29 13:15:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alert_pqs

新虫 (初入文坛)
哦！！是跑的小分子蛋白，只不过只需要确定分子量大致范围就行，应该不是跑出去了，有图有真相，大家再帮忙看看，谢谢！
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-29 20:35:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
能标下图上能看到的条带大小吗？你买来的Marker条带图有吗？最小条带是多少？10kDa or 5kDa or 3kDa or 1kDa？现在跑胶技术最小能显示1kDa的条带。

从你图上看可能分离胶太短，小分子条带扩散了，或者染色不对。
赞一下 回复此楼
关注我关注的
5楼2012-05-29 20:59:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xzx018

铁杆木虫 (著名写手)
我想问下你用的什么胶跑的啊
赞一下 回复此楼
6楼2012-05-29 22:18:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alert_pqs

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-05-29 20:59:38
能标下图上能看到的条带大小吗？你买来的Marker条带图有吗？最小条带是多少？10kDa or 5kDa or 3kDa or 1kDa？现在跑胶技术最小能显示1kDa的条带。

从你图上看可能分离胶太短，小分子条带扩散了，或者染色不对。

1.7-40kDa，总共6条带，后面三条不知道怎么回事就弥散了，没用tricine-SDS-PAGE,直接用的Gly-SDS-PAGE,染色会有问题吗？我是用的考染，先固定30min，再60度10-15min，应该没问题吧，谢谢！
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-29 22:27:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alert_pqs

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xzx018 at 2012-05-29 22:18:20
我想问下你用的什么胶跑的啊

Gly-SDS-PAGE   尿素胶
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-29 22:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 alert_pqs 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 6/300 2026-04-19 13:00 by Aaron_zyn
[考研] 307中医考研调剂 +9 于以采蘩 2026-04-14 9/450 2026-04-19 08:41 by 烟雨流涯
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 291求调剂 +10 关忆北. 2026-04-14 10/500 2026-04-18 23:32 by 路病情
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考博] 申博/考博 +3 啃面包的小书虫 2026-04-17 4/200 2026-04-17 23:54 by 阳阳阳^_^
[考研] 化工学硕294分，求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-16 11/550 2026-04-17 22:34 by chixmc
[考研] 295分求调剂 +5 ?要上岸? 2026-04-17 5/250 2026-04-17 16:51 by fenglj492
[考研] 294求调剂 +7 淡然654321 2026-04-17 8/400 2026-04-17 16:36 by wutongshun
[考研] 一志愿沪9，生物学326求调剂 +9 刘墨墨 2026-04-15 9/450 2026-04-16 17:14 by 崔崔崔cccc
[基金申请] RY：中国产出的科学垃圾论文，绝对数量和比例都世界第一 +7 zju2000 2026-04-14 18/900 2026-04-16 11:36 by 欢乐颂叶蓁
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 求调剂 +12 何气正 2026-04-13 13/650 2026-04-14 14:47 by zs92450
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 302求调剂 +10 易！? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭