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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 小分子蛋白电泳marker
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alert_pqs

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-05-30 00:45:34
那就是扩散了，Tricine-SDS-PAGE中的Tricine在电泳时具有浓缩样品的作用，让小分子样品在浓缩胶时用很好的浓缩效果，并且在分离胶时保持很窄的条带，用Gly代替Tricine就会出现10kDa以下的条带看不到或者很模糊的情 ...

我也做过Tricine-SDS-PAGE  效果差不多，哎  ，，还是谢谢了 ！
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11楼2012-05-30 22:27:27
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
alert_pqs: 金币+2, ★有帮助, 恩 谢谢了 我先按我的想法再试试，实在不行只能彻底改用你说的方法！ 2012-05-31 23:20:37
alert_pqs: 金币+3 2012-06-05 18:51:10
引用回帖:
11楼: Originally posted by alert_pqs at 2012-05-30 22:27:27
我也做过Tricine-SDS-PAGE  效果差不多，哎  ，，还是谢谢了 ！...

4、正极缓冲液（10×）：121.14g Tris溶于400mL重蒸水，充分溶解后用1mol/L HCl调pH8.9，定容至500mL。
5、负极缓冲液（10×）：60.55g Tris，89.58g Tricine，5g SDS，充分溶解后定容至500mL。不用调pH，约为8.25。

建议你做三层胶，0.75mm的10cm*10cm胶板，分离胶3ml，夹层胶1.5ml，浓缩胶1.8ml。分离胶：16% T、6% C、6M脲，夹层胶：10% T、3% C，浓缩胶：5% T、3% C

负极是内槽，用1X负极缓冲液（上述稀释10倍），正极是外槽，用1X正极缓冲液。

我天天做都没问题的
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12楼2012-05-31 19:39:06
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露的想念

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-05-31 19:39:06
4、正极缓冲液（10×）：121.14g Tris溶于400mL重蒸水，充分溶解后用1mol/L HCl调pH8.9，定容至500mL。
5、负极缓冲液（10×）：60.55g Tris，89.58g Tricine，5g SDS，充分溶解后定容至500mL。不用调pH，约为8.2 ...

请问你现在还做吗？
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13楼2014-10-09 16:02:45
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 露的想念 at 2014-10-09 16:02:45
请问你现在还做吗？...

做
14楼2014-10-14 20:12:41
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露的想念

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zxc6884 at 2014-10-14 20:12:41
做

为什么我跑的tricine-sds-page前面的溴酚蓝呈现波浪状，我用的是30v跑出浓缩胶 90V跑后面的 跑了8个小时，还没到底部啊
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15楼2014-10-15 09:13:28
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林夕无忧

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by alert_pqs at 2012-05-29 22:27:40
1.7-40kDa，总共6条带，后面三条不知道怎么回事就弥散了，没用tricine-SDS-PAGE,直接用的Gly-SDS-PAGE,染色会有问题吗？我是用的考染，先固定30min，再60度10-15min，应该没问题吧，谢谢！...

1.7-40kDa的Marker你是从哪个公司买的呀，急需，求告知！
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心若向阳，何惧忧伤！
16楼2015-12-15 11:13:16
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