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新虫 (初入文坛)

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[求助] 小分子蛋白电泳marker

以前电泳marker的条带还好，有6条，但现在，后面的3条基本看不清楚了，应该不是电泳时间过长而跑出去了，模模糊糊可以看清，像是扩散了，请各路大神指点，附图，谢谢！

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附件 1 : SDC15551.JPG

2012-05-28 22:58:07, 1.91 M

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1楼 2012-05-28 22:58:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
alert_pqs: 金币+2, ★有帮助, 恩谢谢了我先按我的想法再试试，实在不行只能彻底改用你说的方法！ 2012-05-31 23:20:37
alert_pqs: 金币+3 2012-06-05 18:51:10

引用回帖:

11楼: Originally posted by alert_pqs at 2012-05-30 22:27:27
我也做过Tricine-SDS-PAGE 效果差不多，哎，，还是谢谢了！...

4、正极缓冲液（10×）：121.14g Tris溶于400mL重蒸水，充分溶解后用1mol/L HCl调pH8.9，定容至500mL。
5、负极缓冲液（10×）：60.55g Tris，89.58g Tricine，5g SDS，充分溶解后定容至500mL。不用调pH，约为8.25。

建议你做三层胶，0.75mm的10cm*10cm胶板，分离胶3ml，夹层胶1.5ml，浓缩胶1.8ml。分离胶：16% T、6% C、6M脲，夹层胶：10% T、3% C，浓缩胶：5% T、3% C

负极是内槽，用1X负极缓冲液（上述稀释10倍），正极是外槽，用1X正极缓冲液。

我天天做都没问题的