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alert_pqs

新虫 (初入文坛)

[求助] 小分子蛋白电泳marker

以前电泳marker的条带还好,有6条,但现在,后面的3条基本看不清楚了,应该不是电泳时间过长而跑出去了,模模糊糊可以看清,像是扩散了,请各路大神指点,附图,谢谢!
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  • 2012-05-28 22:58:07, 1.91 M

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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
alert_pqs: 金币+2, ★有帮助, 恩 谢谢了 我先按我的想法再试试,实在不行只能彻底改用你说的方法! 2012-05-31 23:20:37
alert_pqs: 金币+3 2012-06-05 18:51:10
引用回帖:
11楼: Originally posted by alert_pqs at 2012-05-30 22:27:27
我也做过Tricine-SDS-PAGE  效果差不多,哎  ,,还是谢谢了 !...

4、正极缓冲液(10×):121.14g Tris溶于400mL重蒸水,充分溶解后用1mol/L HCl调pH8.9,定容至500mL。
5、负极缓冲液(10×):60.55g Tris,89.58g Tricine,5g SDS,充分溶解后定容至500mL。不用调pH,约为8.25。

建议你做三层胶,0.75mm的10cm*10cm胶板,分离胶3ml,夹层胶1.5ml,浓缩胶1.8ml。分离胶:16% T、6% C、6M脲,夹层胶:10% T、3% C,浓缩胶:5% T、3% C

负极是内槽,用1X负极缓冲液(上述稀释10倍),正极是外槽,用1X正极缓冲液。

我天天做都没问题的
关注我关注的
12楼2012-05-31 19:39:06
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查看全部 16 个回答

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
重新上图,看不到你的图。
2楼2012-05-29 12:33:55
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废哥117

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看不到你的图啊,根据你的描述,有可能是你的电泳时间过长,不过如果你不是做小分子蛋白,这个没什么大影响的,还有就是你的marker上样多少,是不是上的少了,所以感觉不清晰,不过应该不影响结果,你再做个内参不就行了
不断提高自己
3楼2012-05-29 13:15:51
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alert_pqs

新虫 (初入文坛)

哦!!是跑的小分子蛋白,只不过只需要确定分子量大致范围就行,应该不是跑出去了,有图有真相,大家再帮忙看看,谢谢!


4楼2012-05-29 20:35:06
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