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kabuqinuo89新虫 (小有名气)
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[求助]
细菌用什么破碎会比较好呢
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我进行试验的细菌基因组的长度大约是23kb，用什么方法破碎可以使其长度变成大月2000-3000bp左右的呢 求高手帮忙，万分感谢啊！ |
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jingdejun
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【答案】应助回帖
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小丹木木: 金币+3, 鼓励应助，很热心哦 2012-05-29 13:49:29
kabuqinuo89: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-05-31 12:56:23
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笼统的说，有三类方法。 物理法：用机械力破坏基因组。 化学法：用一些有机试剂来使基因组破坏。 生物法：一般常用的是酶法。 物理法的效果不是很好，获得的片段大小不易控制，且多有损失； 化学法一般都有毒性，并且后期还要较为复杂的后处理； 酶法条件温和，获得的片段大小一般可以提前预知，但是仅限于基因组的结构（或是酶切位点分布）清楚的情况。后处理也比较简单。也可以多个酶同时酶切（注意buffer）。 我个人建议使用酶切法。因为要求不是很严格的话，即便是不清楚酶切位点分布，还是一样可以切，切完之后电泳检测就ok了。若还为达到要求，就继续切。但是最后能否使片段都在2000-3000的范围，我就不能保证了。 当然，你也可以将几种方法结合起来用。效果说不定更好。 |
6楼2012-05-29 08:57:55
kedaxiaoyu
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