应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 逆转录的时候体系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，大于这个数会有什么样的后果？？？
51/1返回列表
查看: 3530  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wmjqy

新虫 (初入文坛)

[交流] 逆转录的时候体系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，大于这个数会有什么样的后果？？？ 已有3人参与

请教一下各位高手。我在做逆转录的时候体系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，但是加入的量却远远大于这个数。我想知道，如果是大于这个量是不是体系就不能逆转了？还是超过这个最大限量，它也只是按50ng/ul进行逆转录？？？？？

[ Last edited by wmjqy on 2012-5-29 at 00:30 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

基因工程、分子技术、微生物理论

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-25 20:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmjqy

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-25 20:33:49
超过这个量，首先是反转录酶的能力有限，不能全部RNA都反转录，如果用来做定量，结果会不准确（不能保证你需要的特定RNA全部被反转录了）。其次，如果加入的体积过大，提取RNA时残留的一些试剂可能会影响酶活力。
...

我是用来做实时荧光定量PCR（QRT-PCR）的。还有想请教高手，我的PCR结果与Western Bolting结果相反。您遇到过这样的问题吗？谢谢！
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-27 00:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 西瓜斑斑辛苦了 2012-05-27 17:32:01
超过这个量，首先是反转录酶的能力有限，不能全部RNA都反转录，如果用来做定量，结果会不准确（不能保证你需要的特定RNA全部被反转录了）。其次，如果加入的体积过大，提取RNA时残留的一些试剂可能会影响酶活力。
不知道你的cDNA打算拿来做什么，如果是做PCR，那实在没必要加过量的RNA啊。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wmjqy
2楼2012-05-25 20:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微微右旋

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不晓得你要来干什么。我一般为了省试剂都把这个体系减半了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-05-27 00:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmjqy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 微微右旋 at 2012-05-27 00:38:47
不晓得你要来干什么。我一般为了省试剂都把这个体系减半了。

稀释的时候算错了。使得加入的剂量远远大于实际剂量。我之前也是用给定的体系逆转录。得到的cDNA我一般会稀释10倍之后再用。想请问一下，我稀释10倍之后会引起结果逆转吗！？？
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-27 00:46:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +7 手机用户 2026-03-17 7/350 2026-03-18 14:34 by vgtyfty
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +7 ZY-05 2026-03-13 8/400 2026-03-18 14:13 by 007_lilei
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[考研] 307求调剂 +3 冷笙123 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:55 by macy2011
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么！ 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭