应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 逆转录的时候体系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，大于这个数会有什么样的后果？？？
51/1返回列表
查看: 3528  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wmjqy

新虫 (初入文坛)

[交流] 逆转录的时候体系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，大于这个数会有什么样的后果？？？ 已有3人参与

请教一下各位高手。我在做逆转录的时候体系要求RNA的最大量是 50ng/ul ，但是加入的量却远远大于这个数。我想知道，如果是大于这个量是不是体系就不能逆转了？还是超过这个最大限量，它也只是按50ng/ul进行逆转录？？？？？

[ Last edited by wmjqy on 2012-5-29 at 00:30 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

基因工程、分子技术、微生物理论

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-25 20:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmjqy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 微微右旋 at 2012-05-27 00:38:47
不晓得你要来干什么。我一般为了省试剂都把这个体系减半了。

稀释的时候算错了。使得加入的剂量远远大于实际剂量。我之前也是用给定的体系逆转录。得到的cDNA我一般会稀释10倍之后再用。想请问一下，我稀释10倍之后会引起结果逆转吗！？？
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-27 00:46:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 西瓜斑斑辛苦了 2012-05-27 17:32:01
超过这个量，首先是反转录酶的能力有限，不能全部RNA都反转录，如果用来做定量，结果会不准确（不能保证你需要的特定RNA全部被反转录了）。其次，如果加入的体积过大，提取RNA时残留的一些试剂可能会影响酶活力。
不知道你的cDNA打算拿来做什么，如果是做PCR，那实在没必要加过量的RNA啊。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wmjqy
2楼2012-05-25 20:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微微右旋

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不晓得你要来干什么。我一般为了省试剂都把这个体系减半了。
赞一下 回复此楼
3楼2012-05-27 00:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wmjqy

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2012-05-25 20:33:49
超过这个量，首先是反转录酶的能力有限，不能全部RNA都反转录，如果用来做定量，结果会不准确（不能保证你需要的特定RNA全部被反转录了）。其次，如果加入的体积过大，提取RNA时残留的一些试剂可能会影响酶活力。
...

我是用来做实时荧光定量PCR（QRT-PCR）的。还有想请教高手，我的PCR结果与Western Bolting结果相反。您遇到过这样的问题吗？谢谢！
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-27 00:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854可跨调剂，一作一项核心论文五项专利，省、国级证书40+数一英一287 +5 小李0854 2026-03-16 5/250 2026-03-18 13:25 by allen-yin
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +9 yangfz 2026-03-17 9/450 2026-03-18 12:38 by 尽舜尧1
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 299求调剂 +5 △小透明* 2026-03-17 5/250 2026-03-18 11:49 by 尽舜尧1
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +7 好运连绵不绝 2026-03-12 8/400 2026-03-17 20:28 by xilongliang
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考博] 26申博 +4 八旬速览 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 一志愿华中师范071000，325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭